GB 4789.3-2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验大肠菌群计数》规定了食品中大肠菌群的计数方法,包括MPN法(Zui可能数法)和平板计数法两种方法,适用于各类食品及食品相关产品的微生物学检验。以下是对该标准的详细解读:
一、适用范围
对象:食品、食品添加剂、食品加工环境样品等。
目标:大肠菌群(Coliforms),指在特定培养条件下能发酵乳糖、产酸产气的需氧或兼性厌氧革兰氏阴性无芽孢杆菌。
不适用对象:非食品样品(如药品、化妆品等)。
二、检测方法
1. MPN法(Zui可能数法)
适用场景:适用于大肠菌群含量较低的食品中大肠菌群的计数。
操作步骤:
样品稀释:将样品进行系列稀释,制成不同浓度的样品匀液。
初发酵试验:每个稀释度接种多管月桂基盐胰蛋白胨(LST)肉汤,培养后观察产气情况。
复发酵试验(证实试验):将产气的LST肉汤管中的培养物移种于煌绿乳糖胆盐(BGLB)肉汤管中,培养后观察产气情况,产气者计为大肠菌群阳性管。
结果报告:根据阳性管数检索MPN表,报告每克(毫升)样品中大肠菌群的MPN值。
2. 平板计数法
适用场景:适用于大肠菌群含量较高的食品中大肠菌群的计数。
操作步骤:
样品稀释:同样将样品进行系列稀释。
平板计数:选取适宜稀释度的样品匀液,接种于结晶紫中性红胆盐琼脂(VRBA)平板上,培养后计数典型和可疑大肠菌群菌落。
证实试验:从VRBA平板上挑取典型和可疑菌落,移种于BGLB肉汤管中,培养后观察产气情况。
结果报告:根据证实为大肠菌群阳性的试管比例乘以平板菌落数,再乘以稀释倍数,即为每克(毫升)样品中大肠菌群数。
三、关键控制点
样品处理:确保样品具有代表性,避免污染。固体和半固体样品需均质处理,液体样品可直接稀释。
培养基准备:根据标准配制相应的培养基,确保无菌性和成分准确。
培养条件:在规定的温度和时间条件下进行培养,确保培养条件符合标准要求。
计数方法:采用多管发酵法或平板计数法测定大肠菌群,确保操作规范,计数准确。
数据处理:对测定数据进行统计分析,确保数据处理方法符合标准要求。
四、结果判定
合格判定:大肠菌群数量≤标准限量为合格。
不合格判定:大肠菌群数量>标准限量为不合格。
五、注意事项
操作规范:严格按照标准操作程序进行检测,避免操作误差。
质量控制:定期进行质量控制实验,确保检测结果的准确性。
安全防护:在检测过程中注意个人防护,避免交叉污染。
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