在《消毒技术规范》（2002版）中，大肠杆菌杀灭试验主要涉及生活饮用水消毒效果鉴定，通过实验室杀菌试验和天然水样消毒试验两个阶段进行检测，以下是具体介绍：
检测生活饮用水消毒剂与消毒器械的杀菌效果，以验证其对生活饮用水消毒能否达到卫生合格标准。
实验菌株：大肠杆菌（8099）悬液。取37℃培养18~24h的新鲜大肠杆菌斜面，用生理盐水洗下菌苔，混匀后再用生理盐水适当稀释，配制成试验用大肠杆菌悬液。
微孔滤膜滤器和滤膜：滤膜孔径为0.45μm~0.65μm，滤膜大小根据滤器型号确定，目前常用有直径为35mm和47mm两种。
抽滤水泵或气泵：用于抽滤。
恒温水浴箱：用于控制试验温度。
秒表：用于计时。
三角烧瓶：用于配制和存放菌悬液等。
广口玻璃瓶（500ml）：用于存放水样等。
无齿镊子：用于夹取滤膜等。
品红亚钠培养基：用于大肠杆菌的培养和计数。
中和剂：经中和剂鉴定合格，用于消除试验微生物与消毒剂的混悬液中和微生物表面上残留的消毒剂。
细菌定量杀灭试验用其他器材：如移液器、试管等。
天然水样：由自然水体取样，用于天然水样消毒试验。
模拟现场消毒装置：用于模拟现场消毒条件。
磁力搅拌器：用于使细菌在水中分布均匀。
实验室杀菌试验：以大肠杆菌为实验菌，用悬液定量杀菌试验法测出在试管中消毒所需的剂量。
天然水样消毒试验：由自然水体取样，进一步验证受试消毒剂或方法对成分较复杂的天然水的消毒效果。对用于较大水体（如人工游泳池水、高层建筑二次供水）消毒的设备和方法，必要时尚需进行模拟现场或现场试验，以进一步验证其消毒效果。
实验分组：
实验组：申请消毒产品卫生许可证时，按使用说明书规定的Zui低剂量，设定1个浓度，3个作用时间（使用说明书规定的Zui低作用时间，规定Zui短作用时间的1.5倍和规定Zui短作用时间的一半），测定其对大肠杆菌的杀菌效果。进行消毒产品监督检测时，按使用说明书规定的Zui低剂量，设定1个浓度，1个作用时间（使用说明书规定的Zui短作用时间），测定其对大肠杆菌的杀菌效果。
阳性对照组：以未经消毒的实验菌污染水样进行活菌培养计数。
阴性对照组：以试验所用同批次未经使用的培养基进行培养，观察有无细菌生长。
操作程序：
按要求配制实验菌污染水样。
将装有实验菌污染水样的三角烧瓶放入恒温水浴箱（20℃±2℃）中，开动磁力搅拌器，使细菌在水中分布均匀。先取2份实验菌污染水样，进行大肠杆菌活菌计数（阳性对照组）。
待水样的温度恒定后加入消毒剂，迅速搅拌均匀。从开始加消毒剂起计时，按规定时间吸取水样，注入装有中和剂的无菌三角烧瓶中，以终止消毒作用。
将中和后水样，分别取一定量进行大肠杆菌的活菌培养计数。
将未接种大肠杆菌的试验用同批培养基平板置温箱中培养（阴性对照组）。
试验重复3次。
评价规定：
当阳性对照组平均菌量在5×10⁴cfu/100ml~5×10⁵cfu/100ml，阴性对照组均无菌生长时，在3次试验中均使大肠杆菌下降至0cfu/100ml的Zui低剂量，可判定为实验室试验中饮水消毒Zui低有效剂量。
若阳性对照和阴性对照未达上述要求，应寻找原因，纠正后重做试验。