在《消毒技术规范》（2002版）中，铜绿假单胞菌杀灭试验主要遵循以下规范和要求：
在实验室内测定消毒剂杀灭悬液中或载体上铜绿假单胞菌所需剂量，以作为确定实用消毒剂量的依据。
试验菌株：铜绿假单胞菌ATCC 15442。
中和剂：根据规范鉴定合格的中和剂，用于消除试验微生物与消毒剂的混悬液中和微生物表面上残留的消毒剂。
培养基：营养肉汤培养基、营养琼脂培养基等，用于铜绿假单胞菌的培养。
其他器材：包括无菌试管、移液器、恒温培养箱、电子天平、pH计、无菌移液管、无菌培养皿等必要的试验器材。
菌悬液制备：
取冻干菌种管，在无菌操作下打开，以毛细吸管吸加适量营养肉汤培养基于管中，轻柔吹吸数次，使菌种融化分散。
取含适量营养肉汤培养基的试管，滴入少许菌种悬液，置37℃培养18h~24h。
用接种环取第1代培养的菌悬液，划线接种于营养琼脂培养基平板上，于37℃培养18h~24h。
挑取上述第2代培养物中典型菌落，接种于营养琼脂斜面，于37℃培养18h~24h，即为第3代培养物。
取第3代~6代的营养琼脂培养基斜面新鲜培养物（18h~24h），用无菌吸管吸取适量稀释液加入斜面试管内，反复吹吸，洗下菌苔。随后，用无菌吸管将洗液移至另一无菌试管中，用电动混合器混合20s，或在手掌上振敲80次，以使铜绿假单胞菌悬浮均匀。
悬液杀菌试验时，实验用菌悬液的含菌量为1×10⁷cfu/ml~5×10⁷cfu/ml。
试验分组：
试验组：按消毒剂对所试菌种的杀灭能力，选定3个消毒剂浓度和4个作用时间进行试验，共为12个剂量。
阳性对照组：以标准硬水代替消毒剂溶液，按试验组规定程序测定菌液在加入标准硬水后，所含铜绿假单胞菌的浓度。以该结果作为阳性对照。
阴性对照组：观察所用中和剂、标准硬水和培养基有无污染，共3组。
杀灭试验：
常用杀灭试验有悬液定量杀灭试验、载体浸泡定量杀灭试验等。
按规范程序进行试验，包括加入消毒剂、中和剂、培养基等步骤，并置于适宜条件下培养。
效果评估：
在杀灭试验结束后，取适量处理后的菌液进行培养，观察并记录菌落生长情况。
通过比较处理组与对照组的菌落数差异，评估消毒剂的杀灭效果。
产品监督检验：按产品使用说明书指定的使用浓度和作用时间，重复试验3次。对铜绿假单胞菌各次试验的杀灭对数值均≥4.00，可判定该产品对铜绿假单胞菌污染物消毒合格。
产品申报卫生许可检验：按产品使用说明书指定的使用浓度和3个作用时间（Zui短作用时间的0.5倍、Zui短作用时间、Zui短作用时间的1.5倍），重复试验3次。在产品使用说明书规定使用浓度与Zui短作用时间，以及Zui短作用时间的1.5倍时，各次试验的杀灭对数值均应≥4.00。在产品使用说明书规定使用浓度与Zui短作用时间的0.5倍时，允许杀灭对数值<4.00，可判为实验室试验该产品对铜绿假单胞菌污染物消毒的有效剂量。