在《消毒技术规范（2002年版）》2.1.1.12中，温度对杀菌效果影响的测定旨在评估不同温度下消毒剂对微生物的杀灭能力，为制定消毒剂的实用剂量提供参考。其核心要求与操作程序如下：
菌片与菌悬液：按规范要求和方法制备。
恒温水浴箱：用于调节和维持试验所需的高温环境。
冷水浴装置：可放入试管架的容器，以冰水调节水温，用于调节和维持试验所需的低温环境。
温度计：用于测量试验环境的水温。
其他器材：包括试管、吸管、培养基等，用于微生物的培养和计数。
根据所测消毒剂鉴定需要决定。一般情况下，除需用于特定微生物者外，对细菌繁殖体应选择大肠杆菌和金黄色葡萄球菌，作为革兰阳性与阴性细菌的代表即可；用作灭菌剂，可使用枯草杆菌黑色变种芽孢。
消毒液浓度：使用杀灭相应微生物试验所得Zui低有效浓度。
作用时间：设置3个~4个作用时间，以该Zui低有效浓度所需的Zui短有效时间为第1时间（T），其后的第2时间为第1时间的一倍（2T），依此类推，第3时间为3T，第4时间为4T。试验结果应根据需要测出杀灭对数值达5.00（消毒用）的Zui低有效剂量。必要时，可根据需要调整消毒剂浓度或作用时间。若第1时间较长（>30min），可根据情况适当缩短作用时间的组距；对第1时间较短者（<5min），可根据情况适当延长作用时间的组距。
温度设置：设置10℃±1℃、20℃±1℃、30℃±1℃等温度组，以10℃为间隔。也可根据实际需要设置其他温度组。
温度调节：对要求试验温度高于室温者，用恒温水浴箱（电热）调节；低于室温者用冷水浴装置（加适量冰水）调节。当上述温度调节装置到达要求温度后，放入装有试验样液的试管，同时放入一含与试验样液等量蒸馏水并插有温度计的试管，待试管内温度计指示到达试验所需温度时，开始随后的试验。
杀菌试验：根据需要，选择悬液定量杀灭试验或载体浸泡定量杀灭试验之一进行测定即可。具体试验程序根据微生物种类可分别参见相关规范条款。
试验重复：各组试验应重复3次，以减少误差。
无影响：该组第1个~4个作用时间的试验，对所试微生物杀灭效果均合格，判为温度对该消毒剂杀菌效果影响不明显。
轻度影响：该组第2个~4个作用时间的试验，对所试微生物杀灭效果合格，判为温度对该消毒剂杀菌效果有轻度影响。
中度影响：该组第3个~4个作用时间的试验，对所试微生物杀灭效果合格，判为温度对该消毒剂杀菌效果有中度影响。
重度影响：该组只第4个作用时间的试验，对所试微生物杀灭效果合格，判为温度对该消毒剂杀菌效果有重度影响。
严重影响：全部试验对所试微生物杀灭效果均不合格，判为温度对该消毒剂杀菌效果有严重影响。为取得消毒或灭菌的有效剂量，需增加消毒液浓度或作用时间，重新进行试验。
非观察因素稳定：在观察温度的影响时，除温度根据需要改变外，其他如pH和有机物浓度等因素均应先后一致。
测量：使用准确的测量设备和方法，以获得准确的试验数据。