鼠疫抗体检测试剂盒(酶联免疫法)

鼠疫抗体检测试剂盒(酶联免疫法)

使  用  说  明（48t/96t）

[原理]

本试剂盒采用亲和素-生物素化鼠疫纯化抗原预包被板elisa原理，检测人血清/血浆中存在的鼠疫igg抗体，并配以酶标记抗人igg单克隆抗体作为标记物。加入底物tmb显色后终止反应，在450nm波长测各孔o.d值，o.d值的大小与待检抗体含量成正比。生物素系统（biotin-avidinsystem）的稳固级联放大作用，使试剂的特异性、灵敏度、稳定性极大地提高是本试剂含有的独特优点。

[用途]

本试剂盒用于定性检测人血清/血浆中的鼠疫igg抗体，用于鼠疫菌苗接种后效果监测和流行病学调研。

[适应范围]

    疫苗接种后效能监测。

    流行病学调研和既往感染的诊断。

[试剂盒组成]

1、生物素化抗原预包被板      1块（8x12/4x12）

2、阴性对照                1瓶（直接使用）          

3、阳性对照                1瓶（直接使用）

4、标本稀释液                

1瓶（20/10ml，直接使用）

5、酶结合物         1瓶（12/5ml，直接使用）

6、30x浓缩洗液              

1瓶（20/10ml，加蒸馏水1：30稀释使用）

7、显示剂a、b液            各1瓶（5/3ml）

8、终止液（2mh2so4）       1瓶（5/3ml）

 [操作步骤]

1、 将试剂盒平衡至室温后取出反应板拆封。

2、样本稀释：用标本稀释液以1：101（5ul—500ul）

稀释标本。于反应板中加已稀释待检标本及阴阳性对照（100ul）各一孔，设空白对照一孔（加100ul标本稀释液），轻拍混匀。

3、37℃温育30分钟。甩去孔内液体，用洗涤液洗板4次并在吸水纸上拍干。

4、加酶结合物：每孔2滴，混匀后置37℃温育30分钟。同上法洗涤3次并拍干。

5、显色：每孔加显色剂a、b各一滴，轻拍混匀（或震荡器混匀）后置37℃10分钟。

[结果判断]

目测：在白色背景下观察各孔显色情况，兰色者为阳性，无色者为阴性。

酶标仪测定：每孔加终止液一滴，混匀后在450nm下测定各孔o.d值。

①p/n=标本o.d值 /阴性对照o.d值。        

②p/n≥2.1为阳性；

③1.5≤p/n<2.1为可疑标本;p/n<1.5为阴     性。

④阴性对照(nc)小于0.10时以0.10计,大于0.1小于0.21时以实际o.d值计算;若大于0.21时,实验可能出现了较大误差,需重复实验。

⑤阳性对照(pc)值通常≥0.4,实验成立,否则需重做。

[注意事项]

微孔板须密封防潮，从冷藏环境中取出时，应置室温平衡至潮气尽干后方可开启使用，余            者封存置2-8℃。

滴加试剂前应将液体翻转数次混匀，滴加时保持瓶身垂直。

洗涤时每孔均须加满，防止孔内有游离酶不能洗净。

试剂置2-8℃存放，不能冻结，有效期10个月。

避免用溶血、混浊或脂血标本。

**用新鲜标本，如需保存，可于2-8℃冷藏48小时或-20℃冻存4周小时或-20℃冻存4周（样本应避光）。