登革热抗体检测试剂盒（酶联免疫法）

登革热抗体检测试剂盒（酶联免疫法）

使  用  说  明（96t/48t）

[用途]

登革热属热带传染病。本试剂盒用于定性检测人血清/血浆中登革热igm型抗体。

适应范围：

      ▓登革热感染的筛查诊断和监测。

      ▓登革热感染之流行病调查和药物疗效监测。

[原理]

本试剂盒采用亲和素-生物素化登革热纯化抗原预包被板elisa原理，检测人血清/血浆中存在的登革热 igm 抗体，配以酶标记抗人igm(h+l链)单克隆抗体作为标记物。加入tmb显色后终止反应，在450nm波长测各孔o.d值，o.d值的大小与待检抗体含量成正比。生物素系统（biotin-avidinsystem）的稳固级联放大作用，使试剂的特异性、灵敏度性、稳定性极大地提高是本试剂含有的独特优点。

[试剂盒组成]

1、纯化登革热抗原预包被板   1块（8x12/4x12）

2、阴性对照                  1瓶

3、阳性对照                 1瓶

4、标本稀释液          1瓶（20/10ml，直接使用）

5、酶结合物                1瓶（12/5ml）

6、30x浓缩洗液             

1瓶（20/10ml，加蒸馏水1：30稀释使用）

7、显示剂a、b           各1瓶（5/3ml）

8、终止液（2m h2so4）      1瓶（5/3ml）

9、说明书                   1份

[操作步骤]

1.  将试剂盒平衡至室温后取出反应板拆封。

2. 加样：将待检标本用标本稀释液作1：41　　　　　（5ul—200ul）稀释，分别加待检标本及阴阳性对照100ul各一孔于反应板中，设空白对照一孔（加100ul标本稀释液），轻拍混匀。

3. 37℃温育30分钟。甩去孔内液体，用洗涤液洗板3次并在吸水纸上拍干。

4. 加酶结合物：每孔2滴，混匀后置37℃温育30分钟。同上法洗涤3次并拍干。

5. 显色：每孔加显色剂a、b各一滴，轻拍混匀（或震荡器混匀）后置37℃10分钟。

[结果判断]

1. 目测：在白色背景下观察各孔显色情况，兰色者为阳性，无色者为阴性。

2. 酶标仪测定：每孔加终止液一滴，混匀后在450nm下测定各孔o.d值。

s/n=标本o.d值/阴性对照o.d值。        

s/n≥2.1为阳性；

1.5≤s/n<2.1为可疑标本;s/n<1.5为阴       性。

④ 阴性对照(nc)小于0.10时以0.10计,大于0.1小于0.21时以实际o.d值计算;若大于0.21时,实验可能出现了较大误差,需重复实验。

⑤阳性对照(pc)值通常≥0.4,实验成立,否则需重做。

[注意事项]

1. 微孔板须密封防潮，从冷藏环境中取出时，应置室温平衡至潮气尽干后方可开启使用，余者封存置2-8℃。

2. 滴加试剂前应将液体翻转数次混匀，滴加时保持瓶身垂直。

3. 洗涤时每孔均须加满，防止孔内有游离酶不能洗净。

4. 试剂置2-8℃存放，不能冻结，有效期10个月。

5. 避免用溶血、混浊或脂血标本。

6. **用新鲜标本，如需保存，可于2-8℃冷藏48小时或-20℃冻存4周（样本应避光）。