伤寒、副伤寒杆菌抗体检测试剂盒（酶联免疫法）

伤寒、副伤寒杆菌抗体检测试剂盒（酶联免疫法）

使  用  说  明（96t/48t）

[原理]

本试剂盒采用亲和素-生物素化sp-抗原（a、b、c）预包被板elisa 原理，检测人血清/血浆中存在的sp- igg抗体，并配以酶标记抗人igg（h+l链）单克隆抗体作为标记物。加入底物tmb显色后终止反应，在450nm波长测各孔o.d值，o.d值的大小与待检抗体含量成正比。生物素系统（biotin-avidin system）的稳固级联放大作用，使试剂的特异性、灵敏度、稳定性极大地提高。

[用途]

   本试剂盒用于定性检测人血清/血浆中的副伤寒沙门杆菌（sp）igg抗体，对伤寒杆菌感染的流行病学调查和追踪传染源有重要的价值，操作优于肥达氏反应，简便、快速、灵敏。

[试剂盒组成]

1、生物素化抗原预包被板     1块（8x12/4x12） 2、阴性对照                 1瓶

3、阳性对照                 1瓶

4、标本稀释液                1瓶（20ml/10ml）

5、酶结合物                 1瓶（12/5ml）

6、30x浓缩洗液             

1瓶（20/10ml，加蒸馏水1：30稀释使用）

7、显示剂a、b液           各1瓶（5/3ml）

8、终止液（2m h2so4）      1瓶（5/3ml）

9、说明书                   1份

[操作步骤]

1、将试剂盒平衡至室温后取出反应板拆封后置于板  

架上。

2、样本稀释：用标本稀释液以1：101（5ul—500ul）稀释标本，分别加已稀释的待检标本及设阴阳性对照100ul各一孔于反应板中，设空白对照一孔（加100ul标本稀释液），轻拍混匀。

3、37℃温育30分钟。甩去孔内液体，用洗涤液洗板      3次并在吸水纸上拍干。

4、加酶结合物：每孔2滴，混匀后置37℃温育30分钟。同上法洗涤3次并拍干。

5、显色：每孔加显色剂a、b各一滴，轻拍混匀（或震荡器混匀）后置37℃10分钟。

[结果判断]

1.  目测：在白色背景下观察各孔显色情况，蓝色者    为阳性，无色者为阴性。

2.  酶标仪测定：每孔加终止液一滴，混匀后在450nm   下测定各孔o.d值。

① p/n=标本o.d值/阴性对照o.d值。        

② p/n≥2.1为阳性；

③ 1.5≤p/n<2.1为可疑标本;p/n<1.5为阴性。

④ 阴性对照(nc)小于0.10时以0.10计,大于0.1小于0.21时以实际o.d值计算;若大于0.21时,实验可能出现了较大误差,需重复实验。

⑤阳性对照(pc)值通常≥0.4,实验成立,否则需重做。

 [注意事项]

1. 微孔板须密封防潮，从冷藏环境中取出时，应置  室温平衡至潮气尽干后方可开启使用，余者封存置2-8℃。

2. 滴加试剂前应将液体翻转数次混匀，滴加时保持瓶身垂直。

3. 洗涤时每孔均须加满，防止孔内有游离酶不能洗净。

4. 试剂置2-8℃存放，不能冻结，有效期10个月。

5. 避免用溶血、混浊或脂血标本。

6. **用新鲜标本，如需保存，可于2-8℃冷藏48小时或-20℃冻存4周（样本应避光）。