钉螺体内血吸虫核酸检测试剂盒(环介导等温扩增技术)

钉螺体内血吸虫核酸检测试剂盒(环介导等温扩增技术)

试剂应避免反复冻融，所有试剂可在第一次溶解时分装陈存备用，分装的离心管需用消毒灭菌处理的0.5或 15高心管。配制反应体系时应将反应管置冰上操作。3.

4配制所有反应体系后宜轻轻混匀，低速离心片刻(s2000 r/min,5s)避免报游或用 tip 反复吹打管内液体。

(五)作

1)反应体系配制:按25l反应体系进行环介导等温扩增(lamp)反应。按照设计，取无荫处理的0.2 ml pcr反应管，分别加入dna 模板 3.0 l、2xlamp反应缓冲液12.5 l序列扩增引物溶液1.01、bstdna聚合酶(bst)1.0 u1、1.0 pi显色试剂(calcein)、无核酸酶水 (ho)6.51。同时每次实验均应设置1管阳性对照 (pc-dna)和1管阴性对照(nc)2)等温扩增反应:将反应管置浮标上，于65c水浴锅，温育60~90min 后室温静置5-10min。

3)结果判定:肉眼观察反应管内液体颜色变化，液体变成绿色判定为阳性;阴性为(棕)黄色。若阴性对照反应管内液体显示绿色，说明实验室或检测系统可能受到其它dna 污染，需重新试验