Stbl3感受态细胞

产品简介

stbl3菌株来源于大肠杆菌hb101菌株，是慢病毒载体系统推荐使用的菌株。基因组带有重组酶reca13突变，可有效抑制长片段末端重复区的重组，降低错误重组的概率；但由于菌株不含核酸酶enda1突变，因此体内核酸酶含量较高，在提取质粒时务必使用质粒提取试剂盒中的去蛋白液进行处理，否则抽提出的质粒很不稳定，易降解。此菌株具有链霉素抗性，不存在laciqzΔm15，不可用于蓝/白斑筛选实验。经puc18转化检测，stbl3感受态细胞的效率可达108cfu/μg dna。

产品组成

组分

cc96134-01

cc96134-02

cc96134-03

stbl3化学感受态细胞

10 × 100μl

100 × 100  μl

定制

基因型：f- mcrb mrrhsds20(rb- mb-)reca13 supe44 ara-14 galk2lacy1 proa2 rpsl20 (strr)xyl-5 λ- leu mtl-1enda1+

存储条件

-80℃保存；请勿将本品置于-20℃或者液氮中保存。

产品特性

-属于大肠杆菌k株系列，主要用于目标基因的克隆和质粒的保存；不可用于以t7rna聚合酶为表达系统的蛋白表达；

-该菌株适合克隆不稳定插入片段，甲基化的基因组序列，以及慢病毒载体的构建。

质量控制

无外源质粒dna残留；

化学法转化效率≥108cfu/μg puc18 dna。

使用方法

1.将感受态细胞从-80℃中取出，置于冰浴中融化；

2.将待转化dna加入到100μl感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育30min；

3.将离心管置于42℃水浴锅中，不要晃动，热激90s后，立刻置于冰浴中静置2-3min；

4.向离心管中加入900μl lb或soc培养基（室温或37℃预热），然后置于37℃摇床复壮45min；

5.取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于37℃培养箱培养过夜。

注意事项

1.感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用；

2.加入的待转化dna的总体积不应超过感受态细胞体积的1/10；

3.加入待转化dna后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可；

4.为确保高转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。