BL21（DE3）感受态细胞

产品简介

本品为使用大肠杆菌bl21(de3)菌株制备的高效化学感受态细胞，转化效率超过107cfu/μg dna，可以用于pet等系列质粒的蛋白高效表达。

产品组成

基因型：f- ompt hsdsb(rb-mb-) gal dcm(de3)

存储条件

-80 ℃保存；请勿将本品置于-20℃或者液氮中保存。

产品特性

-bl21(de3)品系，t7rna聚合酶位于λ噬菌体de3区，该区域被整合于bl21的染色体上；

-是以t7rna聚合酶为表达系统的高效蛋白表达宿主，适合于非病毒蛋白重组表达。

质量控制

无外源质粒dna残留；

化学法转化效率≥107cfu/μg puc18 dna。

使用方法

1. 将感受态细胞从-80℃中取出，置于冰水浴中融化；

2. 将待转化dna加入到100μl感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育30min；

3. 将离心管置于42℃水浴锅中，不要晃动，热激90s后，立刻置于冰水浴中静置2-3min；

4. 向离心管中加入900μl lb或soc培养基（室温或37℃预热），然后置于37℃摇床复壮45min；

5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于37℃培养箱培养过夜。

注意事项

1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用；

2. 加入的待转化dna的总体积不应超过感受态细胞体积的1/10；

3. 加入待转化dna后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可；

4. 为确保高转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。