食品新项目豆芽中尿素的测定 高效液相色谱法国标检测，食品新项目第三方检测机构

豆芽中尿素的测定可采用高效液相色谱法（HPLC）结合荧光检测器进行，以下是具体检测方法及要点：

一、检测方法

1. 样品提取：

2. 准确称取一定量的粉碎后的豆芽样品（如1-5g）于离心管中。

3. 加入适量的无水乙醇（如10-20mL），震荡提取20-30min。

4. 提取液在6000-8000r/min条件下离心3-5min，取上清液过0.45μm微孔滤膜，滤液待测。

5. 衍生化处理：

6. 取上述滤液0.5-1.0mL，加入适量的0.02mol/L9-羟基呫吨醇衍生剂（如50-100μL）和1.5mol/L（如50-100μL）。

7. 使得衍生反应比例范围为：豆芽提取液:0.02mol/L 9-羟基呫吨醇:1.5mol/L=5:1:1至10:1:1。

8. 室温条件下避光反应20-30min。

9. 高效液相色谱分离检测：

10. 采用碳十八烷基键合硅胶为填充剂的色谱柱（如4.6×150mm，5μm）进行分离。

11. 荧光检测器检测，激发波长为213nm，发射波长为308nm。

12. 流动相为乙腈和0.02mol/L乙酸钠溶液，采用梯度洗脱程序。

13. 流速为1.0mL/min，进样量为10μL，柱温为35℃。

14. 外标法定量计算豆芽中尿素的残留量。

二、方法优势

1. 基质干扰小：通过无水乙醇提取豆芽中的尿素，同时沉淀蛋白，降低基质干扰。

2. 准确度高：采用高效液相色谱法进行分离检测，具有较高的准确度和灵敏度。

3. 检出限低：该方法具有较低的检出限，可满足定量分析的需要。例如，有研究显示该方法在0.05～50mg/L范围内线性良好，线性相关系数r²=0.999，豆芽样品中尿素的检出限为0.5mg/kg。

4. 操作简便：该方法操作简便，易于掌握和推广。

三、应用实例

1. 市售豆芽检测：有研究采用该方法检测了市售豆芽中的尿素残留量，结果显示不同品牌和类型的豆芽样品中尿素残留量存在差异。其中，有机豆芽的尿素残留量相对较低，而散装豆芽的尿素残留量则较高。

2. 加标回收实验：通过对市售豆芽进行加标回收实验，验证了该方法的准确性和可靠性。加标回收率在81.1%-104.7%之间，相对标准偏差在4.2%-8.9%之间。