饲料中氨基酸的测定氧化水解GB/T18246-2000第三方检测机构，饲料GB/T18246-2000标准检测

在GB/T 18246-2000标准下，饲料中氨基酸的氧化水解法检测主要涉及以下方面：

一、适用范围

氧化水解法适用于饲料原料、配合饲料、浓缩饲料和精料补充料中含硫氨基酸（胱氨酸、半胱氨酸和蛋氨酸）的测定。

二、检测原理

饲料中的含硫氨基酸用过甲酸氧化并经水解生成磺基丙氨酸和蛋氨酸砜，此二产物可用离子交换色谱法分离测定。

三、试剂与材料

1. 过甲酸溶液：将过氧化氢（30%）与甲酸（88%）按一定比例混合，临用前配制。

2. 氧化终止剂：包括偏重亚钠溶液和氢溴酸。

3. 酸解剂：溶液，浓度为6.0mol/L或6.8mol/L。

4. 其他试剂：如氢氧化钠溶液、柠檬酸钠缓冲液等，均需按标准配制。

四、仪器设备

1. 分析天平：感量0.0001g。

2. 真空泵与真空规：用于抽真空操作。

3. 恒温箱或水解炉：用于控制水解温度。

4. 旋转蒸发器或浓缩器：用于浓缩样品。

5. 氨基酸自动分析仪：茚三酮柱后衍生离子交换色谱仪，要求各氨基酸的分辨率大于90%。

五、检测步骤

1. 氧化和水解：

2. 称取含蛋白质7.5mg~25mg的试样双份，置于旋转蒸发器浓缩瓶或浓缩管中。

3. 加入已经冷却的过甲酸溶液，加液时需将样品全部润湿，但不要摇动。

4. 盖好瓶塞，连同冰浴一道置于0℃冰箱中，反应一定时间。

5. 根据使用不同的氧化终止剂进行后续操作。若以氢溴酸为终止剂，则加入氢溴酸后振摇，放回冰浴静置，然后移至旋转蒸发器或浓缩器上浓缩至干。用溶液将残渣转移到安瓿中，封口后置于恒温箱中水解。若以偏重亚钠为终止剂，则直接加入偏重亚钠溶液，充分摇匀后加入溶液水解。

6. 测定：

7. 用混合氨基酸标准工作液按仪器说明书调整仪器的操作参数和洗脱用柠檬酸缓冲液的pH。

8. 注入制备好的样品和氨基酸标准工作液进行分析测定。

六、结果计算与表示

1. 结果计算：根据色谱图峰面积或峰高计算氨基酸含量。

2. 结果表示：分析结果表示为胱氨酸和蛋氨酸在样品中的质量分数（X），数值以%计。