血清血液牛病毒性腹泻黏膜病检疫技术规范SN/T1129-2015标准检测，SN/T1129-2015第三方检测机构

标准编号：SN/T 1129-2015。

标准名称：牛病毒性腹泻黏膜病检疫技术规范。

发布日期：2015年9月2日。

实施日期：2016年4月1日。

技术归口：国家认证认可监督管理委员会。

批准发布部门：国家质量监督检验检疫总局。

适用范围：适用于进出口动物及其产品中牛病毒性腹泻黏膜病的检疫。

临床诊断：

流行病学：了解牛群的饲养管理、疫病发生情况等。

临床症状：观察牛是否出现体温升高、重度腹泻、白细胞减少、大量流涎、口腔黏膜糜烂和溃疡等症状。

病理变化：检查消化道黏膜是否充血、出血、水肿和糜烂，特别是食道黏膜是否出现特征性病变。

病原学检测：

病毒分离鉴定：采集血液、鼻腔分泌物、胎儿组织等样本，进行病毒分离和鉴定。

荧光抗体试验：利用荧光标记的抗体检测样本中的病毒抗原。

免疫过氧化物酶单层细胞试验：通过免疫过氧化物酶技术检测病毒抗原。

反转录聚合酶链反应（RT-PCR）：检测样本中的病毒核酸，具有灵敏度高、特异性强的特点。

血清学检测：

微量血清中和试验：检测血清中的中和抗体，用于评估牛的免疫状态或感染情况。

抗原捕获酶联免疫吸附试验：利用抗原-抗体反应检测样本中的病毒抗原。

样本采集：根据检测目的和牛的状态规范采集样本，如无菌采血液或精液、采集鼻腔分泌物或胎儿组织等。样本采集后应立即置于冰袋或低温环境中运送至实验室。

样本处理：血液样本需分离血清；精液样本需冻融后稀释离心；组织样本需加缓冲液研磨后离心取上清液。

检测操作：严格按照试剂说明书和标准操作程序进行检测，控制样本采集与处理质量，避免交叉污染；确保仪器设备正常运行校准准确；实验环境温湿度符合要求；操作人员做好个人防护与质量控制。

结果判定：根据不同检测方法的结果判定标准进行判定。对于核酸检测（如RT-PCR），通常以是否出现特异性扩增曲线或电泳条带，以及Ct值是否低于预设阈值来判定样本为核酸阳性或阴性；对于抗体检测（如ELISA），结果通常以样本吸光值与阴性对照吸光值的比值来表示，通过计算样本的S/P值或阻断率，并与试剂盒提供的临界值比较，来判定为抗体阳性、阴性或可疑。

保障进出口动物及其产品的安全：通过严格的检疫技术规范，防止牛病毒性腹泻黏膜病的传入和传出，保障我国畜牧业健康发展。

促进国际贸易：符合国际贸易规则和标准，有利于我国动物及其产品的出口，提高国际竞争力。

提高疫病防控水平：通过规范的检测流程和方法，提高疫病诊断的准确性和及时性，为疫病防控提供科学依据。