血清血液动物布鲁氏菌病诊断技术GB/T18646-2018第三方检测机构，GB/T18646-2018标准检测

GB/T18646-2018《动物布鲁氏菌病诊断技术》标准检测主要涉及血清学和病原学诊断方法，用于检测动物布鲁氏菌病。以下是该标准检测的核心内容：

一、血清学诊断方法

1. 虎红平板凝集试验（RBT）：

2. 原理：利用布鲁氏菌抗原与血清中的抗体发生凝集反应，通过观察凝集现象来判断血清中是否存在布鲁氏菌抗体。

3. 应用：适用于动物布鲁氏菌病的初筛试验。

4. 试管凝集试验（SAT）：

5. 原理：在试管中，将布鲁氏菌抗原与不同稀释度的血清混合，通过观察凝集现象来判断血清中抗体的滴度。

6. 应用：适用于牛种、羊种和猪种布鲁氏菌病的血清学确诊。该标准增加了试管凝集试验中的微量法，提升了检测效率与样本利用率。

7. 注意事项：不适用于犬种和绵羊附睾种布鲁氏菌的检测。猪血清易出现非特异性反应，诊断时需结合流行病学调查，必要时配合补体结合试验或其他鉴别诊断，排除耶森氏菌交叉凝集反应。

8. 补体结合试验（CFT）：

9. 原理：利用抗原抗体复合物结合补体，通过检测补体是否被结合来判断血清中是否存在特异性抗体。

10. 应用：适用于牛种、羊种和猪种布鲁氏菌病的血清学确诊。该标准增加了补体结合试验中的微量法，并详细规定了稀释液制备、溶血素及补体效价测定等方法，让检测流程更规范、精准。

11. 注意事项：不适用于犬种和绵羊附睾种布鲁氏菌的检测。

12. 间接酶联免疫吸附试验（iELISA）：

13. 原理：将布鲁氏菌抗原包被在酶标板上，加入待检血清，若血清中存在相应抗体，就会与抗原结合，再通过酶标记的二抗与结合的抗体反应，Zui后通过显色反应来判定结果。

14. 应用：适用于动物布鲁氏菌病的初筛试验。该标准引入了iELISA诊断方法，提高了检测灵敏度。

15. 竞争酶联免疫吸附试验（cELISA）：

16. 原理：利用抗原抗体竞争结合的特性，将已知的抗原和酶标记的抗体混合，加入待检血清，若血清中存在相应抗体，就会与酶标记的抗体竞争结合抗原，Zui后通过显色反应来判定结果。

17. 应用：适用于牛种、羊种和猪种布鲁氏菌病的血清学确诊。相比传统血清学方法，cELISA特异性更强，灵敏度高，可检测出低水平抗体。

二、病原学诊断方法

1. 涂片染色镜检：

2. 原理：将病料涂片，经过染色后，在显微镜下观察布鲁氏菌的形态和染色特性。

3. 应用：适用于布鲁氏菌病的病原学初步诊断。

4. 分离培养：

5. 原理：将病料接种在适宜的培养基上，通过培养观察布鲁氏菌的生长情况。

6. 应用：适用于布鲁氏菌病的病原学初步诊断。该标准规范了培养细菌所用的培养基及病料采集需采集的样本名称。

7. 生化特性鉴定：

8. 原理：通过检测布鲁氏菌的生化特性，如糖发酵试验、氧化酶试验等，来鉴定布鲁氏菌的种类。

9. 应用：适用于布鲁氏菌病的病原学确诊。该标准增加了病原的生化特性鉴定方法，并规定了不同生化试验的培养基制备。

10. 因子血清试验鉴定：

11. 原理：利用已知的因子血清与布鲁氏菌进行反应，通过观察反应现象来鉴定布鲁氏菌的种类。

12. 应用：适用于布鲁氏菌病的病原学确诊。该标准以表格形式列出单因子血清试验结果。

13. 噬菌体溶解试验鉴定：

14. 原理：利用噬菌体对布鲁氏菌的特异性溶解作用，通过观察噬菌体溶解现象来鉴定布鲁氏菌的种类。

15. 应用：适用于布鲁氏菌病的病原学确诊。该标准以表格形式列出各菌种噬菌体溶解试验结果。

16. PCR扩增图谱鉴定技术：

17. 原理：利用PCR技术扩增布鲁氏菌的特异性基因片段，通过电泳观察扩增条带，来鉴定布鲁氏菌的种类。

18. 应用：适用于布鲁氏菌病的病原学确诊。该标准增加了布鲁氏菌种的PCR扩增图谱鉴定技术，并规范了其8对引物序列。