血清血液牛副结核病检疫技术规范SN/T1084-2010国标检测，SN/T1084-2010第三方检测机构

标准编号：SN/T 1084-2010。

标准名称：牛副结核病检疫技术规范。

发布日期：2010年11月01日。

实施日期：2011年05月01日。

技术归口：国家认证认可监督管理委员会。

批准发布部门：国家质量监督检验检疫总局。

适用范围：本标准规定了牛副结核病的检疫技术规范，适用于牛的副结核病病原和抗体的检验检疫以及牛副结核病的流行病学调查。

流行病学：副结核分枝杆菌主要感染牛，特别是幼年牛更易感染发病。除牛外，绵羊、山羊、骆驼、猪、马、驴、鹿等动物也可感染。病牛和隐性感染牛是传染源，它们可通过乳汁、粪便和尿排出大量病原菌。本病常呈散发或地方性流行，主要经消化道感染，也可通过子宫感染胎儿。

临床症状：发病初期没有明显症状，以后症状逐渐明显，开始是间歇性腹泻，其后逐渐严重和频繁，重者粪便如水样、喷射状排出或稀粥样，含有蛋白凝块、气泡和多量黏液，偶见血丝。早期精神、食欲、泌乳无明显改变，以后食欲减退、精神不佳、泌乳减少或停止，患畜逐渐消瘦、体力不支、经常卧地、被毛粗乱、下颌及肉垂水肿，但体温常无变化。随腹泻症状的延续，则出现进行性的消瘦，直至死亡。

病理变化：早期病变发生在小肠壁和肠系膜淋巴结导管，随着病程进一步发展，在回肠、空肠、小肠后段、盲肠和结肠以及肠系膜淋巴结出现肉眼可见病变。

酶联免疫吸附试验（ELISA）：利用抗原与抗体的特异性结合，通过酶标记抗体检测样本中是否存在病原抗体。该方法操作简便、灵敏度高、特异性强，适用于大规模筛查和流行病学调查。

补体结合试验（CFT）：基于补体与抗原抗体复合物结合的特性，判断样本中抗体情况。该方法操作复杂、耗时较长，但结果可靠，适用于确诊检测。

显微镜检查：取待检粪样，加入氢氧化钠溶液混匀后离心，取沉淀涂片进行萋-尼氏染色，镜检观察抗酸小杆菌。

细菌学检查：通过病原分离培养鉴定流程，包括样本预处理、接种到选择培养基、置于适宜培养环境培养等步骤，观察菌落形态特征并进行染色鉴定和生化反应试验，必要时结合分子生物学方法进一步确认。

样本采集：根据检测目的和动物状态规范采集粪便、血液或组织样本，并进行唯一性标识和低温保存运输。

样本处理：血清样本需恢复至室温并离心澄清；粪便样本需进行去杂均质化处理；肠段和淋巴结样本需选取有明显病变的区域进行处理。

检测操作：严格按照试剂说明书和标准操作程序进行检测，控制样本采集与处理质量，避免交叉污染；确保仪器设备正常运行校准准确；实验环境温湿度符合要求；操作人员做好个人防护与质量控制。

结果判定：根据不同检测方法的结果判定标准进行判定。对于ELISA法，根据吸光度值与临界值比较判定阳性、阴性或可疑；对于CFT法，依据反应现象（如溶血情况）判定；对于病原学方法，则根据是否分离到病原判定。

统一检疫技术方法：确保检疫结果准确可靠，为疫情监测防控提供科学依据。

保障牛养殖业健康发展：降低疫病损失，提高养殖效益。

维护公共卫生安全与牛产品国际贸易秩序：防止疫病传播和扩散，保障牛产品质量安全。