饲料及饲料添加剂饲料中氟喹诺酮类药物的测定液相色谱-串联质谱法 农业部2086号公告-4-2014第三方检测机构

农业部2086号公告-4-2014《饲料中氟喹诺酮类药物的测定 液相色谱-串联质谱法》标准的核心内容如下：

一、适用范围

该标准规定了饲料中氟喹诺酮类药物含量测定的液相色谱-串联质谱法，适用于配合饲料、浓缩饲料、添加剂预混合饲料和精料补充料中环丙沙星、恩诺沙星、诺氟沙星、氧氟沙星、甲磺酸达氟沙星、沙拉沙星等氟喹诺酮类药物含量的测定。

二、检测方法

采用液相色谱-串联质谱法进行测定，具体步骤如下：

1. 样品提取：

2. 称取试样5g（至0.01g）于50mL离心管中。

3. 加入1%甲酸甲醇溶液10.0mL，充分涡旋提取约2min。

4. 5000r/min离心5min，转移上清液至50mL刻度管中。

5. 残余物用1%甲酸甲醇溶液重复提取1次，合并2次上清液，混匀。

6. 样品净化：

7. 准确量取5.0mL提取液于试管中，50℃氮气吹至1mL左右。

8. 加入5mL磷酸盐缓冲液，涡动1min，为上样溶液。

9. 取HLB固相萃取柱，先依次用5mL甲醇、5mL磷酸盐缓冲液活化小柱。

10. 上样溶液全部过柱，用5%甲醇5mL淋洗，挤干。

11. 用1%甲酸甲醇溶液5mL洗脱，挤干，收集洗脱液，涡旋混匀，过滤膜后供上机检测。

12. 液相色谱-串联质谱分析：

13. 采用合适的色谱柱（如C8柱）进行分离。

14. 以特定的流动相（如水+乙腈等体积混合液）进行梯度洗脱。

15. 使用质谱仪在正离子扫描模式下进行检测，采用多反应监测模式（MRM）进行定量分析。

三、技术指标

1. 检测限与定量限：

2. 该方法在配合饲料、浓缩饲料、添加剂预混合饲料和精料补充料中6种药物的检测限为60.0μg/kg，定量限为200.0μg/kg。

3. 线性范围与相关系数：

4. 氟喹诺酮类药物标准曲线的线性相关系数通常大于0.99，表明方法具有良好的线性关系。

5. 回收率与精密度：

6. 回收率在合理范围内，精密度符合分析要求，能够满足实际检测的需要。

四、实施与监管

1. 实施日期：该标准自2014年7月1日起实施。

2. 监管要求：各级饲料管理部门负责督促企业执行该标准，并对市场上的饲料及饲料添加剂进行抽检和监管。对于不符合标准的产品，将依法进行处罚。