常熟市大豆低聚糖低聚糖含量检测

大豆低聚糖含量的测定

a.1范围

本方法规定了采用高效液相色谱法测定大豆低聚糖中低聚糖含量的测定方法。本方法低聚糖各单体的检出限为1.0 g/kg。

a.2原理

试样用80%乙醇溶解后,经0.45um滤膜过滤,采用反相键合相色谱测定,根据色谱峰保留时间定性,根据峰面积或峰高定量,各单体的含量之和为大豆低聚糖含量。

a.3试剂

除非另有说明,在分析中仅使用确认为优级纯的试剂。

a.3.1水:符合gb/t 6682--级水的要求。

a.3.2乙腈。

a.3.380%乙醇溶液:量取800 ml无水乙醇加水稀释至1 000 ml。

a.3.4低聚糖标准溶液:分别称取蔗糖、棉子糖、水苏糖标准品(含量均应≥98%)各1.000 g置于100ml容量瓶中,用80%乙醇溶液溶解并稀释至刻度,摇匀。每毫升溶液分别含蔗糖、棉子糖,水苏糖10 mg。经0.45pum滤膜过滤,滤液供hplc分析用。

a.4仪器

除常规实验室仪器设备外,还包括以下仪器设备:

a.4.1高效液相色谱仪:附示差折光检测器。

a.4.2高效液相色谱分析参考条件

a.4.2.1色谱柱:kromasil 100氨基柱,25 cm×4.6 mm,或相同性质的填充柱。

a.4.2.2流动相:v(乙腈)＋v(h,o)=-80＋20。

a.4.2.3流速:1.0 ml/ min。

a.4.2.4检测器:示差折光检测器(rid)。a.4.2.5色谱柱温度:30 ℃.

a.4.2.6检测器温度:30 ℃.a.4.2.7进样量:10 pl。

a.4.3天平:分度值0.000 1 g.