多杀巴斯德杆菌检测方法GB/T 14926.5-2001第三方检测机构，GB/T 14926.5-2001国标检测
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GB/T 《实验动物 多杀巴斯德杆菌检测方法》国标检测解析
标准编号：GB/T
发布日期：2001年8月29日
实施日期：2002年5月1日
主管部门：科学技术部
归口单位：全国实验动物标准化技术委员会（TC281）
起草单位：中国实验动物学会
主要起草人：李红
标准状态：现行有效
本标准适用于豚鼠、地鼠和兔多杀巴斯德杆菌的检测。
多杀巴斯德杆菌为革兰阴性小杆菌，寄居于豚鼠、地鼠和家兔的上呼吸道，具有特定的生化反应。其菌体可与相应的免疫血清在玻片上产生肉眼可见的凝集反应，据此可对该菌进行分离培养和检测。检测方法主要包括样本采集、分离培养、生化鉴定和血清学检测等步骤。
样本采集
采集部位：根据动物种类和感染部位的不同，采集呼吸道分泌物、病灶分泌物或肝、肺、脾等组织样本。
采集原则：严格无菌操作，避免交叉污染。样本量要足够，且具有代表性。
保存与运输：样本采集后应尽快送实验室检测。保存时可用合适保存液，低温保存防变质。运输过程中保持适宜温度、湿度，避免震荡、挤压。
分离培养
培养基选择：使用血琼脂平皿等选择性培养基进行分离培养。
培养条件：将接种后的培养基置于（36±1）℃培养24-48小时，观察菌落特征。
菌落特征：多杀巴斯德杆菌在血琼脂平皿上形成1mm左右、光滑露滴样或灰白色、不溶血的菌落。
生化鉴定
鉴定项目：包括菌体形态、生化反应等。
菌体形态：革兰阴性小杆菌，两端钝圆并浓染，新分离菌株可有荚膜，经人工培养后很快消失。
生化反应：葡萄糖、乳糖和麦芽糖阳性；尿素酶、鸟氨酸脱羧酶阳性，赖氨酸脱羧酶阴性；西蒙氏柠檬酸盐试验阴性；氧化酶、过氧化氢酶阳性；不液化明胶。
血清学检测
检测方法：包括玻片凝集试验和ELISA等。
玻片凝集试验：取纯化菌液与多杀巴斯德杆菌阳性血清混合，2分钟内出现肉眼可见凝集为阳性。
ELISA检测：采用间接ELISA法，以纯化抗原包被酶标板，检测样品中特异性抗体。该方法可定量检测抗体水平，适用于隐性感染监测和免疫效果评价。
阳性报告：凡符合上述各项检测结果者作出阳性报告。
阴性报告：不符合者作出阴性报告。
修订背景：随着微生物学领域的发展和实验动物行业的规范化需求，本标准可能会根据新的研究成果和实际需求进行进一步的修订和完善。
更新方向：未来修订可能包括增加新的检测方法、更新生化鉴定指标、提高检测灵敏度和特异性等方面的内容。
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一般项目：环境保护监测；生态资源监测；土地调查评估服务；工程和技术研究和试验发展；医学研究和试验发展；自然科学研究和试验发展；农业科学研究和试验发展；终端计量设备销售；计量技术服务；标准化服务；公路水运工程试验检测服务；进出口商品检验鉴定；环保咨询服务；环境应急治理服务（除许可业务外，可自主依法经营法律法规非禁止或限制的项目）许可项目：检验检测服务；特种设备
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