肺炎克雷伯杆菌检测方法GB/T 14926.13-2001第三方检测机构，GB/T 14926.13-2001标准检测
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GB/T 《实验动物 肺炎克雷伯杆菌检测方法》标准解析
标准编号：GB/T
发布日期：2001年8月29日
实施日期：2002年5月1日
主管部门：科学技术部
归口单位：全国实验动物标准化技术委员会（TC281）
起草单位：中国实验动物学会
主要起草人：范薇
标准状态：现行有效（上次复审日期为2023年12月28日，复审结论为继续有效）
替代标准：全部代替GB/T
本标准适用于小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠、兔等实验动物肺炎克雷伯杆菌的检测。
肺炎克雷伯杆菌在培养基上具有特定的生长、形态和生理生化特征，本标准基于这些特征制定了详细的检测方法，主要包括以下步骤：
采样：
采集回盲部内容物或病灶组织等样本。
分离培养：
将样本接种至DHL琼脂平皿，置于（36±1）℃培养18至24小时。
DHL琼脂是本标准指定的分离培养基，相较于旧版标准中的SS琼脂、麦康凯琼脂等，DHL琼脂更为方便且有效。
鉴定：
V-P试验阳性
硝酸盐还原试验阳性
M.R阴性
西蒙氏柠檬酸盐利用实验阳性
丙二酸盐试验阳性
尿素酶阳性
赖氨酸脱羧酶阳性
鸟氨酸脱羧酶阴性
能利用葡萄糖和乳糖
靛基质阴性
菌落特征：肺炎克雷伯杆菌在DHL琼脂平皿上形成淡粉色、大而隆起、光滑湿润且呈粘液状的菌落，相邻菌落易融合成脓汁样，接种针挑取时可拉出较长的丝。
菌体特征：革兰阴性短杆菌，大小为（0.3～0.5）μm×（0.6～6.0）μm，有荚膜。病变组织直接涂片显示菌体呈卵圆形或球杆状，荚膜较菌体宽2-3倍。
初步鉴定：转种克氏双糖或三糖铁琼脂，于（36±1）℃培养18至24小时后，斜面产酸，底层产酸产气或仅产酸，硫化氢阴性。
生化鉴定：
半固体动力试验：阴性。
结果判定：
凡符合上述各项检测结果者作出阳性报告，不符合者作出阴性报告。
修订背景：随着微生物学领域的发展和实验动物行业的规范化需求，本标准在2001年进行了修订，删除了旧版标准中不适用或效果不佳的培养基（如SS琼脂、麦康凯琼脂等），增加了DHL琼脂作为分离培养基，提高了检测的准确性和灵敏度。
未来展望：随着技术的不断进步和实验动物行业的持续发展，本标准可能会根据新的研究成果和实际需求进行进一步的修订和完善。
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