饲料 GB/T 18246-2000 饲料中氨基酸的测定第三方检测机构，GB/T 18246-2000 国标检测

GB/T 18246-2000《饲料中氨基酸的测定》规定了饲料中氨基酸的测定方法，适用于配合饲料、浓缩饲料、添加剂预混合饲料、单一饲料和预混料中氨基酸总量和添加游离氨基酸的测定。以下是对该国标检测的详细介绍：

一、检测方法

饲料中氨基酸检测方法主要有酸水解法、碱水解法、酸提取法三种，其中酸水解法又分为常规水解法、氧化水解法两种。

1. 酸水解法：

2. 常规水解法：使饲料蛋白在110℃、6mol/L作用下，水解成单一氨基酸，再经离子交换色谱法分离并以茚三酮做柱后衍生测定。水解中，色氨酸全部破坏，不能测量；胱氨酸和蛋氨酸部分氧化，不能测准。

3. 氧化水解法：将饲料蛋白中的含硫氨基酸（如胱氨酸、半胱氨酸和蛋氨酸等）用过甲酸氧化，然后进行酸解，再经离子交换色谱分离、测定。水解中色氨酸破坏，不能测定；酪氨酸在以偏重亚钠做氧化终止剂时，被氧化，不能测准；酪氨酸、苯丙氨酸和组氨酸则在以氢溴酸作终止剂时被氧化，不能测准。

4. 碱水解法：饲料蛋白在110℃、碱的作用下水解，水解出的色氨酸可用离子交换色谱或高效反相色谱分离、测定。碱水解法只适用于色氨酸的测定。

5. 酸提取法：饲料中添加的氨基酸以稀提取，再经离子交换色谱分离、测定。酸提取法适用于配合饲料、预混料和浓缩饲料中添加氨基酸（主要是赖氨酸、蛋氨酸含量）的测定，也可用于苏氨酸等其他添加（游离）氨基酸含量的测定。

二、检测设备与试剂

1. 检测设备：包括氨基酸自动分析仪、分析天平、液相色谱仪、样品粉碎机、样品筛、真空泵、空气规、喷灯、熔焊机、恒温箱、水解炉、旋转蒸发器、浓缩器等。

2. 试剂与材料：除特别注明者外，所有试剂均为分析纯，水为去离子水。包括溶液、氢氧化钠溶液、柠檬酸钠缓冲溶液、茚三酮溶液、氨基酸混合标准储备液等。

三、检测步骤

1. 样品制备：对饲料样品进行酸水解或碱水解以释放结合态氨基酸，确保测量的全面性。

2. 衍生化处理：通过适当的衍生化反应，提高氨基酸在液相色谱检测中的灵敏度与分离度。

3. 液相色谱分析：利用高效液相色谱（HPLC）进行氨基酸定性和定量分析，确保检测结果的准确性。

四、注意事项

1. 样品均匀性：样品的代表性直接影响结果准确性，须兼顾批次差异。

2. 水解条件控制：过度或不足水解均会影响氨基酸释放，需控制水解时间和温度。

3. 衍生化剂选择：应根据特定氨基酸性质选用合适衍生化试剂。

4. 仪器校准和维护：定期校准设备，确保检测灵敏度和准确性。