土壤真菌来源广泛,常见属包括:
丝状真菌:Aspergillus(曲霉)、Penicillium(青霉)、Fusarium(镰刀菌)、Cladosporium(枝孢霉)、Mucor(毛霉)等
酵母:Candida(念珠菌)、Rhodotorula(红酵母)等
在锅炉水环境中,这些真菌可能:
在高温区段形成耐热菌丝体+胞外多糖黏泥
与细菌共同构成复合生物膜,增加清洗难度
代谢产物改变局部 pH 或氧化还原电位,促进腐蚀
部分产毒真菌(如黄曲霉)可能影响水质安全(虽在锅炉中少见,但需关注)
采样:土壤样 + 对应锅炉水样(对照)
前处理:提取土壤悬液,富集真菌
分离培养:用适合真菌的选择性培养基
纯化与计数:获得单菌落并统计 CFU
鉴定:形态 + 生理生化 + 分子方法
风险评估:结合耐热性、产黏性判断对锅炉的影响
土壤样:在补给水源取水口附近、地表 0–15 cm 土层多点混合取样,总量 500 g 左右
沉积物样:河床或井底泥沙
水样:同期的锅炉补给水或循环水
使用无菌工具,样品 4℃ 冷藏,24 h 内处理
土壤/沉积物与无菌生理盐水或 PBS 按 1:10(w/v)混合
震荡 200 rpm × 30 min,静置取上清液
如需富集耐热真菌:可在 45–50℃ 水浴短时间孵育(避免细菌过度生长)
可直接取上清液涂布或稀释后涂布
常用真菌选择性培养基:
PDA(马铃薯葡萄糖琼脂):广谱真菌,基础培养基
Sabouraud Dextrose Agar (SDA):高葡萄糖、低 pH,抑制细菌
Dichloran Glycerol 18 Agar (DG18):低水活度,适合耐干/耐盐真菌
加抗生素(氯霉素 50 mg/L 或庆大霉素)抑制细菌
对耐热真菌可调整培养温度至 40–50℃
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