吴中区饲料维生素D3含量检测

饲料中维生素d3的测定

高效液相色谱法

1范围

本标准规定了饲料中维生素d。的高效液相色谱法测定。

本标准第一法适用于配合饲料,浓缩饲料,复合预混合饲料,维生素预混合饲料中维生素d,的测定,定量限为12.5pg/kg(5001u/kg)。

本标准第二法适用于维生素预混合饲料中维生素d的测定,定量限为125 mg/kg(5×10°1u/kg)。2规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的*新版本。凡是不注日期的引用文件,其*新版本适用于本标准。

gb/t603化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备

gb/t 6682分析实验室用水规格和试验方法

gb/t 14699.1饲料采样

gb/t 20195动物饲料试样的制备

3第一法皂化提取法

3.1原理

用碱溶液皂化试样,**提取维生素d.,蒸发**,残渣溶解于甲醇并将部分溶液注入高效液相色谱反相净化柱,收集含维生素d。淋洗液,蒸发至干,溶解于适当溶剂中,注入高效液相色谱分析柱,在264nm处测定,外标法计算维生素d。含量。

3.2试剂和溶液

除特殊注明外,本标准所用试剂均为分析纯,水符合gb/t 6682中三级用水规定﹐色谱用水符合gb/t6682中一级用水规定,溶液按照gb/t603配制。

3.2.1 无水**(不含过氧化物)

3.2.1.1过氧化物检查方法;用5 ml**加1 ml碘化钾溶液(3.2.9),振摇 1min,如有过氧化物则放出游离碘,水层呈黄色,或加淀粉指示液(3.2.10),水层呈蓝色。该**需处理后使用。

3.2.1.2去除过氧化物的方法:**用硫代硫酸钠溶液(3.2.11)振摇,静置,分取**层,再用水振摇，洗涤两次,重蒸,弃去首尾5%部分,收集馏出的**,再检查过氧化物,应符合规定。

3.2.2无水乙醇。

3.2.3 正己烷:色谱纯。

3.2.4l,4-二氧六环。

3.2.5甲醇:色谱纯。

3.2.6 2.6-二叔丁基对甲酚(bht)。

3.2.7无水硫酸钠。

3.2.8氮气(纯度99.9 %)。

3.2.9碘化钾溶液:100 g/l。