洪山区食品维生素A、D、E含量检测公司

gb5009.82—2016食品安全国家标准食品中维生素a、d、e的测定

1范围

本标准规定了食品中维生素a,维生素e和维生素d的测定方法。本标准第一法适用于食品中维生素a和维生素e的测定。

本标准第二法适用于食用油、坚果,豆类和辣椒粉等食物中维生素e的测定。本标准第三法适用于食品中维生素d。和维生素d。的测定。

本标准第四法适用于配方食品中维生素d。或维生素d的测定。

第一法惇食品中维生素a和维生素e的测定反相高效液相色谱法

2原理

试样中的维生素a及维生素e经皂化(含淀粉先用淀粉酶酶解)提取、净化,浓缩后,c。或pfp反相液相色谱柱分离v紫外检测器或荧光检测器检测,外标法定量。

3试剂和材料

除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为gb/t6682规定的一级水。

3.1试剂

3.1.1无水乙醇(ch,oh);经检查不含醛类物质,检查方法参见a.1.3.1.2抗坏血酸(ch.o:).

3.1.3氢氧化钾(koh).

3.1.4︰醚[(ch,ch,):o];经检查不含过氧化物,检查方法参见a.2.3.1.5石油醚(c,hzoa):沸程为30℃~6o℃.

3.1.6无水硫酸钠(na,so,).

3.1.7ph试纸(ph范围1~14)。

3.1.8甲醇(ch,oh):色谱纯。

3.1.9淀粉酶:活力单位≥100 u/mg.

3.1.102,6-二叔丁基对甲酚(cs ho):简称bht。

3.2试剂配制

3.2.1氢氧化钾溶液(50 g/100 g)﹔称取50 g氢氧化钾,加入50 ml水溶解,冷却后,储存于聚乙烯瓶中。

3.2.2石油醚-醚溶液(1＋1);量取200 ml石油醚,加入200 ml醚,混匀。

3.2.3有机系过滤头(孔径为0.22 um).3.3标准品

3.3.1维生素a标准品

视黄醇(ca。h,o,cas号:68-26-8);纯度≥95%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。3.3.2维生素e标准品

3.3.2.1 a-生育酚(c,ho.,cas号:10191-41-0);纯度≥95%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。

3.3.2.2β-生育酚(caho,cas 号:148-03-8):纯度≥95%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。

3.3.2.3 r-生育酚(cahgo:,cas号:54-28-4);纯度≥95%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。

3.3.2.4 8-生育酚(ch0:,cas号;119-13-1);纯度≥95%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。

3.4标准溶液配制

3.4.1维生素a标准储备溶液(0.500 mg/ml):准确称取25,0 mg维生素a标准品﹐用无水乙醇溶解后,转移入50ml容量瓶中,定容至刻度v此溶液浓度约为0.500 mg/ml。将溶液转移至棕色试剂瓶中,密封后,在一20℃下避光保存v有效期1个月。临用前将溶液回温至20 ℃,并进行浓度校正(校正方法参见附录b)。

3.4.2维生素e标准储备溶液(1.00 mg/ml);分别准确称取ar生育酚、β生育酚、r生育酚和8-生育酚各50.0mg,用无水乙醇溶解后,转移入50 ml容量瓶中,定容至刻度﹐此溶液浓度约为 1.00mg/ml。将溶液转移至棕色试剂瓶中,密封后,在一20 ℃下避光保存,有效期6个月。临用前将溶液回温至20℃,并进行浓度校正(校正方法参见附录b)。

3.4.3维生素a和维生素e混合标准溶液中间液:准确吸取维生素a标准储备溶液1.00 ml和维生素e标准储备溶液各5.00 ml于同一50 ml容量瓶中,用甲醇定容至刻度﹐此溶液中维生素a浓度为10.0 pg/ml,维生素e各生育酚浓度为100 ug/ml。在一20℃下避光保存,有效期半个月.

3.4.4维生素a和维生素e标准系列工作溶液;分别准确吸取维生素a和维生素e混合标准溶液中间液0.20 ml,0.50 ml,1.00ml,2.00 ml,4.00 ml,6.00 ml于 10 ml棕色容量瓶中,用甲醇定容至刻度﹐该标准系列中维生素a浓度为0.20pg/ml,o.50 ug/ml、1.00 ug/ml、 2.00 ug/ml,4.00 ug/ml,6.00ug/ml,维生素e浓度为2.00 ug/ml、5.00 pug/ml、10.0 pug/ml、20.0 ug/ml,40.0pug/ml,60.0 ug/ml。临用前配制。