旋转细胞培养系统 RCCS 3H
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- 更新时间
- 2020-08-21 21:10
开始细胞传代前,仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全:一般主要有:细胞(单层细胞,RCCS-3H,镜检适合)、培养液(MEM-0.2%LH 培养液或MEM 培养液或199 等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血X清、庆大溶液(1 万单位)、7.5%NaHC03 溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS 洗液。

用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、胶塞、吸管(10ml、1m1)、细胞吹打管(20 ml)(以上用具需经121℃至
少15 分钟高压灭菌)、C02 孵箱、超净台、倒置显微镜、4℃、—20℃冰箱

操作步骤:镜检细胞,RCCS-2D,挑选生长状态良好,细胞界限清晰,具有立体感,形态好无污染、无异常及可X疑病变细胞。配制细胞培养液:按以下配比配制MEM-0.2%LH 培养液100ml 内,加入灭活小牛血X清10m1,庆大溶液0.3m1,7.5%碳酸氢钠溶液3ml。(仅供一般参考)。消化细胞;先用PBS 洗液冲洗细胞表面1-2 次,每次10m1,弃去洗液,向细胞瓶内加入0.25%胰蛋白酶溶液,RCCS,每瓶1m1,细胞瓶平放,使消化液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入10m1 细胞培养液吹打分散细胞,按所需的传代比例分装于小方瓶(100m1)中,再加入10m1 细胞培养液重复吹打一次后分装,然后补加至所需培养量。加塞,置于37±1℃孵箱培养。约2~4 天成片。(由细胞接种浓度决定);填写传代记录。
1.1 研究开发,如新药筛选,RCCS-3D,疫1苗、基因工程、细胞工程研究与开发、单抗1体制备等。
1.2 基础研究,如作用机理、基因功能、疾病发生机理等研究。
2 生物制药,疫1苗生产:如病毒性疫1苗(肝2炎病毒疫1苗、艾1滋病疫1苗等),多肽疫1苗(肿1瘤疫1苗)等。
2.2 基因工程生产:如EPO等。
2.3 抗1体、基因治1疗生产。
2.4 细胞工程生产:生物细胞内的一些生物活性多肽,生物活性物质等。
2.5 利用细胞法体外测定生物活性物质的活性;并预测其在体内的和替代体内法检测其成品的生物活性。

这种三维组织培养有望应用在疾病研究上。M.D. Andersonai症中心的Wadih Arap表示:“对于ai症研究,磁场所产生的‘隐性支架’已经不再是单纯的细胞培养,而让它们更像真正的肿1瘤。我们下一步将应用这种磁性来探索肿1瘤成像和治1疗上的应用。”

三维细胞培养,TPP耗材,PCR操作台,可降解支架,离心机
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