Hydroxyphenyl fluorescein (HPF) 羟苯基荧光素

hydroxyphenyl fluorescein (hpf)羟苯基荧光素   a5235  1mg    -20ºc避光保存
产品描述
氨基苯基荧光素（apf）和羟苯基荧光素（hpf）是由t. nagano 开发的两种活性氧（reactive oxygenspecies, ros）指示剂，比 h2dcfda（dcfh-da, dcfh）具更的特异性和稳定性。apf 和 hpf显示有限的非选择性反应，和相对较高的光诱导氧化抗性。apf 和 hpf具细胞膜渗透性，本身无荧光，直到与羟基自由基或过氧亚硝基阴离子反应，还能与次氯酸阴离子反应，产生强绿色荧光（ex/em，~490/515nm），可用荧光显微镜、高通量成像仪、荧光酶标板或流式细胞仪检测。
本品以粉末形式提供，可直接溶于无水 dmf 配制成 5mm 储存液，常用工作浓度范围1-10μm，需根据自身的实验体系或参考文献进行优化。
产品特性
1） cas no.：359010-69-8
2） 同义名：3'-p-(hydroxyphenyl) fluorescein (hpf) 羟苯基荧光素
保存与运输方法
保存：-20ºc 避光干燥保存，至少 1 年有效。运输：冰袋运输。
使用方法
一、 储存液制备
将低温保存的 1mg 粉末置于室温回温至少 20min，之后加入 471μl 无水 dmf 配置成 5mm储存液。充分溶解和混匀后，按照单次用量分装，-20ºc 避光干燥保存，避免反复冻融。
【注】：hpf 能溶于 dmso（10mm），但有数据显示 dmso 是羟基自由基的淬灭剂，会干扰检测和降低灵敏性。因此，建议用dmf作为溶剂。
二、 溶液体系检测
正式实验前，取一管hpf 储存液置于室温回温，使其充分融解。之后用合适的缓冲液（比如hhbs 缓冲液， pbs缓冲液）稀释到所需的工作浓度。建议起始浓度为 1-10μm，需根据自身的实验体系或参考文献进行优化。
三、 细胞体系检测
以下实验步骤仅做参考，的工作浓度、孵育时间和温度需根据实际情况进行调整。在加入 hpf工作液之前按需处理细胞。
1）根据具体用量，将dmf 储存液用 hhbs 缓冲液或其他生理缓冲液稀释成 1-10μm 工作液。
2）根据实验设计处理细胞（比如，rasm 细胞用 50-100nm  血管紧张素ii 处理3-5h）。
3）取步骤 1）准备的 1-10μm 工作液加入细胞，37ºc 孵育 20-60min。
4）吸掉染色工作液，用hhbs 或其他生理缓冲液替换。
5）用合适的荧光仪器（ex/em=492/515nm）来检测。
【注 1】：bsa 和酚红会影响荧光，需谨慎使用。

【注 2】：hpf 和 apf 能用于溶液体系或胞内 ros 检测。

注意事项：
1）apf 和 hpf 仅用于科研研究，不可用于体外诊断研究。
2）apf 和hpf 产生的荧光相对于其他活性氧探针比如 dcfh 弱很多，这是探针本身的特性决定的（见附表 1 活性氧探针（hpf,apf, dcfh）对各种活性氧物质的反应特异性）。
3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

黑龙江久丰生物工程有限公司

联系人：赵世杰

电话：（微信） 0451-51035213

地址：黑龙江省哈尔滨市南岗区大众新城1期125栋9号商服