河南半胱氨酸 武汉远大弘元有限公司 乙酰半胱氨酸

武汉远大弘元股份有限公司以氨基酸及其衍生物的研发、生产为基础，以武汉大学生命科学学院和湖北省氨基酸工程技术研究中心的成果为依托，河南半胱氨酸，为客户提供的产品。

胱氨酸，因此只用于合成l-半胱氨酸的中间体。尽管l-胱氨酸和l-半胱氨酸的微生物方法生产日益受到人们的重视，半胱氨酸，但是由于技术原因，仅日本报道了有关微生物酶法生产l-胱氨酸和l-半胱氨酸的较为成熟的生产工艺

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天津工业生物技术研究所研究员刘君带领的微生物生理和代谢工程研究组以谷氨酸棒杆0菌为宿主细胞，探究了l-半胱氨酸合成瓶颈，构建了高效的l-半胱氨酸合成细胞工厂。该研究首先通过敲除半胱氨酸脱巯基酶和过表达自身的丝氨酸乙酰转移酶（cyse），实现了l-半胱氨酸的积累。然后通过多种代谢工程策略进一步提高l-半胱氨酸的合成，包括增强关键酶cyse的表达强度；比较多个异源的cyse，寻找0优的候选者；过表达l-半胱氨酸合成酶增强合成通量；比较多个异源的转运蛋白，半胱氨酸厂家，增强l-半胱氨酸的转运能力以及提高前体丝氨酸的供给等策略。终获得的工程菌株cys-19能够积累947.9±46.5mg/l l-半胱氨酸，是目前报道的利用谷氨酸棒杆0菌生产l-半胱氨酸的0高水平

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天津工业生物技术研究所研究员刘君带领的微生物生理和代谢工程研究组和研究员江会锋带领的新酶设计与酵母基因组工程研究组进行合作，通过结合代谢工程和蛋白质工程的方法，系统地改造大肠杆0菌，实现了oah的高效合成。在研究中，首先比较了两种不同来源的高丝氨酸乙酰转移酶(metx)，乙酰半胱氨酸，然后通过敲除竞争和消耗途径基因(meta，metb和thrb)并过表达合成途径基因(thra，metxlm)，实现了oah的积累，其产量达到1.68g/l。为了进一步提高oah的生产，该研究采用多种代谢工程策略对工程菌株进行进一步改造，包括：敲除赖氨酸竞争途径基因lysa；利用启动子工程调控ppc表达以增强草酰乙0酸的供给；比较不同来源的天冬氨酸激酶，促进前体天冬氨酸的合成等，使oah的产量提高至4.69g/l。然而，中间代谢产物高丝氨酸的大量积累说明其下游途径关键酶metxlm的催化能力是不足的。为了解决这一问题，该研究分别采用基于进化保守性和基于结构信息的蛋白质工程策略对metxlm进行改造，获得的突变体酶活比野生型提高了12.15倍并受到更少的反馈抑制。通过优化表达metxlm突变体，使工程菌株oah产量达到7.37g/l。随后该研究通过过表达胞内乙酰coa合成途径，调控胞内nadph的合成，进一步提高oah的合成能力。终获得的工程菌株oah-7在7.5l发酵罐中经60 h发酵能够生产62.7 g/l的oah，是目前报道的0高水平。

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