A260/A280 比值
纯 DNA:1.8‑2.0;<1.8 蛋白污染;>2.0 RNA 污染
纯 RNA:2.0‑2.2;比值偏低提示蛋白、酚类残留
A260/A230 比值:评估多糖、酚、盐离子残留,理想>2.0
特点:快速无损;只能判断杂质类别,不能分辨降解、异源核酸
DNA:条带单一明亮、无拖尾 = 纯度好;弥散拖尾代表降解、RNA 残留
RNA:28S/18S 条带清晰,RIN 值评估完整度,RIN>7 为高质量 RNA
输出 RIN(RNA)/DIN(DNA)数值,定量片段分布、降解程度,比普通电泳精准。
检测残留宿主基因组 DNA、质粒残留、外源核酸污染,适合制剂级生物试剂。
还原 / 非还原电泳;考马斯亮蓝、银染;观察杂蛋白条带,目测纯度
局限:低丰度杂质检出有限,高分子 / 小分子杂质有漏检
SEC‑HPLC 体积排阻色谱:看蛋白聚合体、二聚体、单体、降解片段;计算单体占比,生物药 / 重组蛋白常用
RP‑HPLC 反相色谱:分辨氨基酸突变、修饰差异、降解肽段
自动化,可给出纯度百分比,灵敏度高于 SDS‑PAGE,适合蛋白试剂质控。
测蛋白浓度;A260/A280 判断核酸残留:纯蛋白 A260/A280≈0.5‑0.6,比值升高代表核酸污染。
测总蛋白含量,不直接测纯度,配合电泳 / HPLC 联合使用。
重组表达生物试剂重点项目:ELISA、LC‑MS、qPCR 检测宿主杂质残留。
内毒素(LPS):鲎试剂 LAL 检测,细胞级试剂必做
残留酚、有机溶剂、盐离子:紫外、离子色谱
微生物限度:细菌、真菌、支原体(细胞实验试剂)
蛋白酶 / 核酸酶残留:酶活实验,防止目标分子被降解
普通科研级试剂:Nanodrop + 琼脂糖电泳(核酸);SDS‑PAGE+A280(蛋白)
细胞实验 / 体外诊断原料:增加 SEC‑HPLC,内毒素,支原体,HCP/HCD 筛查
申报级 / 药典级生物试剂:毛细管电泳、LC‑MS、完整蛋白分子量、杂质定量全套,符合 ChP/EP 要求
核酸:浓度、A260/A280、A260/A230、电泳图片 / RIN 值、有无降解、杂质判断
蛋白:蛋白浓度、SDS‑PAGE 图谱、SEC‑HPLC 纯度百分比、聚合体占比、核酸残留、HCP/HCD(按需)
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许可项目:检验检测服务;认证服务;接受司法机构委托开展专业鉴定服务;农产品质量安全检测;建设工程质量检测;雷电防护装置检测;室内环境检测;安全生产检验检测;民用航空油料检测服务(依法须经批准的项目,经相关部门批准后方可开展经营活动,具体经营项目以相关部门批准文件或许可证件为准)一般项目:环境保护监测;计量技术服务;进出口商品检验鉴定;服装、服饰检验、整理服务
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