碘化丙锭(Propidium Iodide, PI),CAS:25535-16-4,是一种膜不通透性红色荧光核酸染料,常用于细胞生物学研究,区分死 / 活细胞、染细胞核与染色体。
分子式:C₂₇H₃₄I₂N₄,分子量:668.39
外观:深红色结晶粉末;熔点:220–225 ℃(分解)
溶解性:易溶于水、DMSO、DMF;水溶液橙色、弱荧光
光谱(游离):激发 493 nm / 发射 636 nm
光谱(结合 DNA):激发 535 nm / 发射 617 nm,荧光增强 20–30 倍
储存:–20 ℃避光,有效期 2–3 年;避免反复冻融
膜不通透性:活细胞膜完整→PI 进不去;死 / 晚期凋亡细胞膜破损→PI 进入。
核酸嵌入结合:嵌入 DNA 双链碱基之间(无序列偏好),也结合 RNA;结合后荧光显著增强、波长偏移。
细胞活力 / 死细胞染色(Zui常用)
与 Calcein‑AM(活细胞绿荧光)双染,流式 / 荧光显微镜区分活 / 死细胞。
药物毒性、细胞存活率、免疫杀伤(CTL/NK)实验。
细胞周期分析(流式)
染色 DNA,G0/G1、S、G2/M 期 DNA 含量不同→峰位不同,用于周期分布与增殖活性检测。
细胞核 / 染色体复染(荧光显微)
红色核标记,用于免疫荧光(IF)、免疫组化(IHC)、染色体观察、核形态异常检测。
细胞凋亡检测
晚期凋亡 / 坏死:膜破损,PI 阳性;常与 Annexin V‑FITC 双染,区分早期凋亡(Annexin V+PI–)与晚期凋亡 / 坏死(Annexin V+PI+)。
微生物与其他
细菌 / 真菌死活染色、计数;也用于凝胶染色、流式微球分析。
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