饮用水大肠埃希氏菌检测 耗氧量 菌落总数检测
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- 昆山市陆家镇星圃路12号智汇新城生态产业园B区7号厂房3楼
- 更新时间
- 2026-05-10 08:59
检测意义
大肠埃希氏菌（E. coli）是粪便污染的明确指示菌，其存在表明饮用水可能受到病原微生物污染，直接威胁人体健康。
检测方法
多管发酵法（国标传统法）：
取水样接种乳糖发酵管，37℃培养24小时，观察产酸产气现象。
转移产气发酵管至EC肉汤，44.5℃培养24小时，进一步确认大肠埃希氏菌。
通过系列生化试验（如靛基质试验、甲基红试验等）Zui终鉴定。
原理：通过乳糖发酵管富集培养，结合生化鉴定（如吲哚试验、甲基红试验等）和Zui可能数（MPN）法计算菌数。
步骤：
周期：2-3天，结果精准但耗时较长。
滤膜法：
过滤100mL水样，将滤膜置于麦康凯琼脂平皿上，37℃培养18-24小时。
计数符合特征菌落，结合生化试验确认。
原理：水样经滤膜截留细菌，转移至选择性培养基（如麦康凯琼脂）培养，计数典型菌落（粉红色至红色，圆形凸起）。
步骤：
周期：1-2天，适合低浊度水样（如饮用水）。
快速检测法：
酶底物法：利用大肠埃希氏菌特异性β-葡萄糖醛酸酶活性，分解荧光底物（如MUG），在紫外灯下观察荧光菌落。
PCR技术：通过扩增大肠埃希氏菌特异性基因（如uidA基因），1-2小时内完成定量检测。
免疫胶体金法：15-30分钟定性检测，适合现场快筛。
标准限值
生活饮用水（GB 5749-2022）：不得检出（每100mL水样中未检出）。
地表水（GB 3838-2002）：Ⅰ-Ⅲ类水源地不得检出；Ⅳ类≤230 CFU/100mL；Ⅴ类≤10000CFU/100mL。
城镇污水处理厂出水（GB 18918-2002）：一级A标准≤1000 CFU/L，一级B标准≤10000 CFU/L。
检测意义
耗氧量（以O₂计）反映水中有机物污染程度，是评价水体自净能力及消毒副产物前体物的重要指标。
检测方法
酸性滴定法（GB/T 5750.7-2006）：
取100mL水样于锥形瓶中，加入硫酸酸化，加入溶液，沸水浴加热30分钟。
加入草酸钠溶液还原过量，再用回滴过量草酸钠。
原理：在酸性条件下氧化水中还原性物质，过量用草酸钠还原，根据消耗量计算耗氧量。
步骤：
计算：
耗氧量（mg/L）=V(V1−V2)×c×8×1000
1 其中，$V_1$为草酸钠消耗体积（mL），$V_2$为回滴体积（mL），$c$为浓度（mol/L），$V$为水样体积（mL），8为氧摩尔质量（g/mol）。 22. 碱性滴定法：
适用于氯离子含量较高的水样（如海水），步骤与酸性法类似，但水样加氢氧化钠呈碱性。
影响因素
取样：需摇匀后取样，避免还原物质分布不均。
加热时间：沸水浴时间需严格控制，时间不足导致氧化不完全，过长可能引发副反应。
滴定温度：耗氧量随滴定温度降低而增大，需在60-80℃下滴定。
标准限值
生活饮用水（GB 5749-2022）：耗氧量≤3mg/L（以O₂计，法）。
检测意义
菌落总数反映水体卫生状况及污染程度，是评价水质清洁度和净化效果的关键指标。
检测方法
平板计数法（GB 4789.2-2022）：
取1mL水样（或稀释液）加入无菌平皿中，倒入15-20mL冷却至46℃的营养琼脂培养基，混匀后凝固。
倒置平皿，36±1℃培养48±2小时，选择菌落数在30-300 CFU的平板计数。
原理：将水样接种于营养琼脂培养基，37℃培养24-48小时后计数菌落。
步骤：
计算：
菌落总数（CFU/mL）=接种体积（mL）平均菌落数×稀释倍数
快速检测法：
阻抗法：利用微生物生长产生的阻抗变化监测菌数，如BACTOMETER全自动检测系统。
ATP生物发光法：通过检测微生物细胞内ATP含量快速估算菌数，15分钟内完成检测。
膜过滤法：结合荧光染色（如丫叮橙染色）在显微镜下观察计数，检测时间缩短至约1小时。
标准限值
生活饮用水（GB 5749-2022）：菌落总数≤100 CFU/mL。
小型集中式供水/分散式供水：因条件受限，菌落总数限值可放宽至500 CFU/mL。