山楂叶《中国药典》2015版一部紫外-可见分光光度法（通则0401）标准检测，山楂叶第三方检测机构

在《中国药典》2015版一部中，山楂叶采用紫外-可见分光光度法（通则0401）进行检测时，主要关注的是总黄酮的含量测定。以下是山楂叶在该标准下的检测要点：

一、总黄酮含量测定原理

山楂叶中的总黄酮类化合物在特定条件下能与铝离子形成稳定的络合物，该络合物在紫外-可见光区有特征吸收峰，通过测定其吸光度可以计算出总黄酮的含量。

二、检测步骤

1. 对照品溶液的制备：

2. 精密称取芦丁对照品适量，加乙醇制成每1ml含芦丁0.20mg的溶液（必要时超声处理使溶解），作为对照品溶液。

3. 标准曲线的制备：

4. 精密量取对照品溶液1ml、2ml、3ml、4ml、5ml、6ml，分别置25ml量瓶中。

5. 各加水至6ml，加5%亚溶液1ml，摇匀，放置6分钟。

6. 加10%硝酸铝溶液1ml，摇匀，放置6分钟。

7. 加氢氧化钠试液10ml，再加水至刻度，摇匀，放置15分钟。

8. 以相应试剂为空白，在紫外-可见分光光度计上于500nm波长处测定吸光度。

9. 以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。

10. 供试品溶液的制备：

11. 取山楂叶细粉约1g，精密称定，置索氏提取器中。

12. 加加热回流提取至提取液无色，弃去液。

13. 药渣挥去，加甲醇继续提取至无色（约4小时）。

14. 提取液蒸干，残渣加稀乙醇溶解，转移至50ml量瓶中，加稀乙醇至刻度，摇匀，作为供试品贮备液。

15. 取供试品贮备液，滤过，精密量取续滤液5ml，置25ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

16. 测定法：

17. 精密量取供试品溶液2ml，置25ml量瓶中，照标准曲线制备项下的方法，自“加水至6ml”起依法测定吸光度。

18. 从标准曲线上读出供试品溶液中芦丁的重量，计算总黄酮含量。

三、计算与结果判定

四、注意事项

1. 仪器校正：紫外-可见分光光度计应定期进行波长准确度和吸光度准确度的校正，以确保测定结果的准确性。

2. 试剂纯度：所用试剂应为分析纯或更高纯度，以避免杂质对测定结果的干扰。

3. 操作规范：在制备对照品溶液和供试品溶液时，应严格按照操作规程进行，确保每一步操作的准确性和可重复性。

4. 测定环境：测定环境应避免强光直射和剧烈振动，以免影响测定结果的稳定性。