农药化学农药环境安全评价试验GB/T 31270.14-2014第三方检测机构,农药国标检测
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GB/T 31270.14-2014《化学农药环境安全评价试验准则 第14部分:藻类生长抑制试验》规定了藻类生长抑制试验的材料、条件、操作、质量控制、数据处理和试验报告等基本要求,以下是详细介绍:
适用于为化学农药登记而进行的藻类生长抑制试验,其他类型的农药可参照使用。
不适用于易挥发和难溶解的化学农药。
半效应浓度(EC50):在生长抑制试验中,使供试生物生物量增长或者生长率比对照下降50%时的供试物浓度。
平均生长率:一定暴露时间内藻类单位生物量增长的对数值。
生物量增长:一段暴露时间内藻类单位生物量的增加量。
材料和条件
供试生物:推荐采用普通小球藻、斜生栅列藻或羊角月芽藻等。
供试物:农药制剂、原药或纯品。对难溶于水的农药,可用少量对藻毒性小的有机溶剂、乳化剂或分散剂助溶,用量不得超过0.1mL(g)/L。
主要仪器设备:酸度计、血球计数板、分光光度计、玻璃器皿等。
培养基:推荐选择水生4号培养基培养斜生栅列藻,选择BG11培养基培养羊角月芽藻,选择BG11培养基或SE培养基培养普通小球藻。
试验条件:试验环境温度21℃~24℃,连续均匀光照,光照强度差异应保持在±15%范围内,光强4440lx~8880lx。
试验步骤
藻种准备:按无菌操作法将试验用藻接种到装有培养基的锥形瓶内,在适宜条件下培养,反复接种2次~3次,使藻基本达到同步生长阶段。
预试验:按正式试验的条件,以较大的间距设置若干组浓度,求出供试物使试验用藻生长受抑制的Zui低浓度和不受抑制的Zui高浓度,在此范围内设置正式试验的浓度。
正式试验:在预试验确定的浓度范围内以一定比例间距设置5个~7个浓度组,并设一个空白对照组,使用助溶剂的还应增设溶剂对照组,每个浓度组设3个重复。试验观察期为72h,每隔24h取样,在显微镜下用血球计数板准确计数藻细胞数,或用分光光度计直接测定藻的吸光度。
数据处理
根据收集的数据计算出半数效应浓度(EC50)值,这是一个用来描述当某种化学物质达到某一浓度时,能引起一半数量测试对象出现毒性反应的参数。EC50越低表示该化学品对藻类的危害越大。
对照组受试藻的初始浓度、生长速率及其变异系数应符合标准要求。
被试物浓度检测应准确可靠。
可设置参比物试验,验证藻种的敏感度处于历史正常范围。
试验报告中应至少包含以下内容:
试验目的、方法、材料和条件。
试验结果,包括藻类生长抑制率、EC50值等。
试验结论,评估供试物对藻类的毒性效应。
质量控制措施和结果。
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