化学品毒理学评价程序和试验方法第15部分：亚急性经口毒性试验GBZ/T 240.15-2011第三方检测机构

GBZ/T 240.15-2011标准检测核心内容如下：

一、适用范围与目的

GBZ/T 240.15-2011标准适用于检测化学品的亚急性（14d/28d）经口毒性，旨在确定一定时期内反复多次经口染毒受试样品而引起的健康危害，评估化学品对动物的蓄积作用，为亚慢性、慢性毒性或致癌性的剂量设计提供依据。

二、试验方法

1. 受试样品处理：

2. 受试样品应新鲜配制，根据试验目的和受试样品的理化特性，经口染毒可采用灌胃或将受试样品混入饲料、饮水等方式。

3. 受试样品应溶解于溶剂中或悬浮于适宜的赋形剂中，建议水，其次是植物油（如玉米油）作溶剂，或考虑使用赋形剂（如羧甲基纤维素、明胶、淀粉等）。

4. 应先了解溶剂或赋形剂的毒理特性，并确定受试样品在配置液中的稳定性。

5. 实验动物与饲养环境：

6. 实验动物一般健康成年大鼠，其他啮齿类动物也可使用。雌性动物应是未交配过的，大鼠以6周~8周龄为宜，Zui大鼠龄不超过9周。在试验开始时，同性别动物体重之间相差不得超过平均体重的20%。

7. 试验前动物应在符合国家相应规定的试验环境中适应3d~5d，再随机分配到各试验组和对照组中。动物单笼饲养，大鼠群养时每笼不超过5只。

8. 剂量设计：

9. 动物应随机分配到试验组与对照组中。试验时至少设三个剂量组和一个对照组，还可增设一个附加组，每组实验动物至少应有10只（雌雄各半）。

10. 高染毒剂量的设计应为引起动物明显毒效应但不造成动物死亡，中剂量应引起较轻的可观察到的毒性效应，低剂量应不出现任何毒效应。剂量组的剂量间距以2倍~4倍为宜。

11. 对照组除不接触受试样品外，其他处理应与染毒组完全相同。

12. 试验步骤：

13. 每周染毒7d，连续14d/28d。以灌胃方式染毒时，通过调整受试样品溶液浓度使各剂量组经口染毒的容量一致。以喂饲或饮水方式染毒时，受试样品的混入应不影响正常的营养。

14. 每周称体重一次，以作为调整受试样品给药剂量的依据。以喂饲或饮水方式染毒时，应根据染毒剂量和动物体重配制饲料或饮水中受试样品的浓度（mg/kg），并每日测量一次饲料或饮水消耗量。

15. 临床观察：

16. 观察期限一般为14d/28d，每天一次，观察并记录皮肤、被毛、眼、黏膜的改变和呼吸系统、循环系统、神经系统、肢体活动、行为方式等变化发生的时间、程度和持续时间。

17. 如发现动物死亡或濒危，应及时解剖或冷藏后解剖检查，以减少动物同类互残及死后组织自溶。

18. 临床检查：

19. 血液学检查：试验结束时测定血红蛋白浓度、红细胞数、白细胞总数和分类计数、红细胞压积等，必要时测定凝血功能如凝血时间、凝血酶原时间、凝血激酶时间或血小板等指标。

20. 血液生化检查：在试验结束时进行，检查指标主要包括丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、白蛋白（Alb）、总蛋白（TP）等。

三、结果评价

根据观察结果和检查数据进行统计分析，根据统计分析结果和受试样品的毒性表现，对化学品的亚急性经口毒性进行评价。