消毒产品消毒技术规范(2002年版)2.3.10 致畸胎试验标准检测，消毒产品第三方检测机构

《消毒技术规范》（2002年版）2.3.10 致畸胎试验标准检测

一、试验目的

致畸试验旨在鉴定受试物是否具有致畸性，即评估受试物在胚胎发育过程中是否引发死亡、结构畸形或生长迟缓等毒性效应。该试验为消毒剂等受试物的安全使用提供科学依据。

二、试验动物选择

试验动物多选用大鼠、小鼠或家兔，这些动物的代谢特征和胎盘解剖学结构与人类相近，且具有一胎多仔、妊娠期较短、便于饲养等优点。

三、剂量和分组

1. 剂量设置：

2. 至少设3个剂量组，其中2个为实验组，1个为阴性对照组。

3. 高剂量组所用剂量应可引发母体可观察毒性，但母体死亡率不应超过10%。

4. 低剂量组剂量应不产生明显的毒性反应。

5. 中间剂量组剂量应处于高剂量组和低剂量组之间，以观察剂量-反应关系。

6. 分组要求：

7. 每组至少10只孕鼠，以确保试验结果的可靠性和统计学意义。

四、试验方法

1. 孕鼠的检出和给受试物的时间：

2. 雌鼠和同龄的雄鼠按一定比例同笼交配。

3. 每日观察阴道栓或阴道涂片，查出阴栓或精子的当天定为孕期零天。

4. 在大鼠孕期6~15天期间，每天灌胃给予受试物。此阶段为胚胎器官形成期，是致畸敏感期。

5. 孕鼠处死和一般检查：

6. 对于第20天孕大鼠或第18天孕小鼠，采用颈椎折断、静脉气栓法或麻醉后断头处死。

7. 剖腹检查卵巢内黄体数，取出子宫称重，检查活胎、早期吸收和迟死胎数目。

8. 活胎检查：

9. 逐个记录活胎鼠的体重、性别、身长和尾长。

10. 外观检查头颅外形、面部、躯干、四肢等有无畸形，如露脑、脑膨出、眼部畸形、鼻孔扩大、单鼻孔、唇裂、脊柱裂、四肢及尾畸形等。

11. 胎鼠骨骼标本制备和检查：

12. 对于每窝约2/3活胎鼠，用眼科镊子剥皮，取出内脏，去掉后颈和两肩胛骨之间的脂肪块，然后将胎鼠放入茜素红溶液软化染色。

13. 待骨骼染红后，将胎鼠换入透明液中，使软组织透明，骨骼清晰可见。

14. 在体视显微镜下，用透射光源观察胎鼠全身骨骼，检查有无骨化不全、骨化迟缓和其他缺陷，如脊椎缺失、融合、纵裂等畸形，肋骨融合、分叉、中断、缺肋、短肋、波状肋、多肋畸形等。

15. 胎鼠内脏检查：

16. 将每窝约1/3活胎鼠浸入固定液后一周作内脏检查。

17. 把已固定的胎鼠用自来水冲洗干净，仰放在石蜡板上，剪去四肢和尾巴，用刀片从头部开始，往下逐渐经头、胸、腹各部位依次共切数刀，再用小剪刀剖开腹腔。

18. 着重检查是否有裂舌、双叉舌、裂腭及眼、鼻和脑部的畸形，是否出现右位心、心脏过大、肺过大或过小等畸形，消化系统和泌尿生殖系统各器官的大小、形状以及位置，有无肾盂积水、一侧或两侧有无睾丸、子宫发育不全等畸形。

五、结果评价

1. 观察指标：

2. 主要观察动物畸胎出现率，同时观察其他指标，如着床数、活胎数、晚期死胎数、早期死亡数，以及活胎体重、身长、尾长等。

3. 剂量-反应关系：

4. 观察全部结果的剂量-反应关系，确定受试物的母体毒性、发育毒性及致畸性。

5. 致畸指数：

6. 求出受试物的Zui小致畸剂量和Zui大无致畸作用剂量。

7. 对致畸强度应以致畸指数表示，致畸指数 = (雌鼠LD50) / (Zui小致畸剂量)。

8. 致畸指数小于或等于10为基本不致畸；大于10至100为致畸；大于100为强致畸。