化学品溞类急性活动抑制测试（Daphnia acute immobilization test）是一种水生生态毒理学标准方法，用于评估化学品（如工业废水、农药、表面活性剂、切削液添加剂等）对溞类（如水溞 Daphnia magna）的急性毒性，通过观测溞类在暴露后短时间内（通常24或48小时）的活动抑制（不动/死亡）程度，计算EC₅₀（半数效应浓度，即导致50%受试生物活动抑制的浓度），为化学品的风险评估、排放标准和环境管理提供科学依据。
该方法在国际上广泛采用，例如 OECD Test Guideline 202（“Daphnia sp., Acute Immobilisation Test”）、ISO 6341（水溞急性活动抑制试验）、我国 GB/T 21828-2008《化学品 溞类急性活动抑制试验》 等。
将溞类（常用大型溞 Daphnia magna，新生个体＜24小时龄）暴露于一系列浓度的受试化学品溶液中，在规定时间（24 h或48 h）后统计不动（immobilized）个体比例。不动的定义为：用轻微水流或玻璃棒触碰后，溞类仍不能游动。根据浓度-效应关系，计算 EC₅₀（24 h或48 h），用以表征化学品对溞类的急性毒性强度。
溞类是淡水生态系统的初级消费者，对环境毒物极为敏感，是国际通用的水生生态毒性指示生物。
种类：shouxuan 大型溞 Daphnia magna（guojibiaozhun）；也可用其他溞种（如 D. pulex），但需说明。
年龄：出生＜24小时的幼溞（首次产出的幼溞，无食物暴露史）。
驯养条件：
水温：20±2℃（OECD 202推荐20±1℃）
光照周期：16 h光照 / 8 h黑暗
培养用水：标准稀释水（如OECD标准水或国标规定的硬度、pH、离子组成的去离子水加营养盐）
喂养：单胞绿藻（如 Pseudokirchneriella subcapitata），每日一次，保证健康繁殖。
试验前禁食：试验开始前至少2小时不喂食，以减少代谢差异。
溶剂与助溶剂
优先使用去离子水直接溶解受试物。
如必要，可使用少量助溶剂（如DMF、乙醇），但溶剂浓度应≤0.1 mL/L，并设置溶剂对照组。
浓度系列
至少设5个浓度组（如、50%、25%、12.5%、6.25%的预期EC₅₀附近浓度），加空白对照组（稀释水）和溶剂对照组。
可采用几何级数稀释（如1:2或1:√2）。
曝气与均匀性
测试溶液在试验前应进行适当曝气（去除余氯，维持溶解氧），并保持均匀分布。
| 温度 | 20±1℃（或国标20±2℃） |
| pH | 6.0～9.0（记录初始与结束值） |
| 溶解氧 | ≥3 mg/L（zuihao≥60%饱和度） |
| 光照强度 | ≤1000 lux（避免直射光导致藻类生长） |
| 容器 | 玻璃或惰性材质，容量≥100 mL，每浓度≥20只溞 |
| 暴露时间 | 24 h与48 h分别读数 |
| 生物数量 | 每组≥20只溞，独立容器或平行样≥4组 |
预试验（范围探索）：确定大致的致死/不动浓度范围，以便主试验设置合理浓度。
主试验：
在每个容器中放入20只幼溞（或每组≥4平行，每平行5只）。
记录初始状态（全部可动）。
分别于 24 h 与 48 h 观察记录不动个体数。
判定不动：用细玻璃棒或微水流触碰后不能游动。
及时移除死亡/不动个体，避免二次中毒影响其他个体。
质量控制：
溶剂对照组不动率≤10%。
空白对照组不动率≤10%。
试验期间pH变化≤1.5，温度波动≤±1℃。
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