菜籽饼粕及其饲料中噁唑烷硫酮的测定方法及要点如下：
紫外分光光度法是菜籽饼粕及其饲料中噁唑烷硫酮测定的核心方法，其原理基于噁唑烷硫酮在特定波长（245nm）下的吸光度与其浓度呈线性关系。具体步骤如下：
样品制备：
采集代表性样品至少500g，四分法缩分至50g，粉碎后使80%通过0.28mm筛孔，混匀备用。
菜籽饼粕称取1.1g，配合饲料称取5.5g，于103±2℃烘箱中干燥8小时，冷却后jingque称重。
酶解反应：
将干燥样品转移至250ml三角烧瓶中，加入70ml沸pH7.0缓冲液，冷却至30℃后，加入0.5g白芥子酶源（由白芥籽经脱脂处理制备）和几滴去泡剂，室温振荡2小时。
立即将内容物转移至100ml容量瓶中，用水洗涤烧瓶并稀释至刻度，过滤后备用。
萃取与测定：
取滤液（菜籽饼粕1ml，配合饲料2ml）于分液漏斗中，用二氯甲烷萃取两次，合并层于25ml容量瓶中，定容后摇匀。
在200-280nm波长范围内测定吸光度，用Zui大吸光度值减去280nm处的吸光度值，得到试样测定吸光度值（Ae）。
空白与校正：
试样空白：按上述步骤操作，但不加酶源（菜籽饼粕此项免去，Ae为零）。
酶源空白：不加试样，仅加酶源，测得值为酶源空白吸光度值（Ac）。
计算公式：
X=m(Ae−AB−Ac)×Cp
1其中，$X$为每克绝干样中噁唑烷硫酮的毫克数，$Cp$为转换因素（吸光度为1时，每升溶液中噁唑烷硫酮的毫克数，值为8.2），$m$为试样绝干质量（g）。GB/T 13089-2020：规定了饲料中噁唑烷硫酮的紫外分光光度测定方法，适用于菜籽及其加工产品（如菜籽饼粕）以及含有菜籽及其加工产品的配合饲料、浓缩饲料和精料补充料。
NY/T 1799-2009：与GB/T 13089-2020内容基本一致，但发布时间较早，部分技术细节可能已更新。
限量要求：根据GB 13078-2017，产蛋禽配合饲料中噁唑烷硫酮限量≤500毫克/千克，其他家禽配合饲料≤1000毫克/千克。
样品均匀性：
样品需充分粉碎并混合均匀，避免因颗粒大小差异导致结果偏差。
采样量需足够（至少500g），四分法缩分至50g后，再粉碎至80%通过0.28mm筛孔。
酶解条件控制：
酶解温度需jingque控制在30℃，时间2小时，确保硫代葡萄糖苷充分水解为噁唑烷硫酮。
酶源活性需稳定，白芥子酶源需在4℃下保存，且保存期不超过6周。
萃取效率优化：
二氯甲烷萃取需充分，每次萃取后需合并层并定容至刻度，避免目标物损失。
萃取过程中需避免剧烈振荡导致乳化，影响分离效果。
吸光度测定准确性：
需在200-280nm波长范围内测定吸光度，用Zui大吸光度值减去280nm处的吸光度值，消除背景干扰。
仪器需定期校准，确保波长准确性。
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