植物酶活测定机构

植物酶是将数十种不同的蔬果、谷类、海藻类及菇类等植物，经自然发酵研制而成，保留了植物中的营养精华，含有人体需要的各种酶、寡糖及多种维他命和矿物质，又可产生丰富的sod抗氧化酶成分，提高体内抗氧化能力，进而增强免疫力。以营养学的观点来说，植物酶是借由发酵作用，使蔬果分解成较小分子的营养素，可直接被人体迅速吸收、参与调节新陈代谢过程。建议营养摄取不均衡、消化吸收状况差、上班容易疲劳的人，不妨食用植物酶来调整体质。一般建议，植物酶在空腹时食用效果较好，也比较不易受到胃酸的破坏。

关于植物酶活，北京清析技术研究院可提供ph、温度、亚硝酸盐、硫代硫酸盐、还原糖、丙酮酸、异丙酸、琥珀酸、柠檬酸、葡萄糖酸、丝氨酸、苯丙氨酸、酚类物质、菌素类物质、酶解蛋白、单宁酸、可溶性总酚、脂多糖、过氧化物酶、过氧化氢酶等检测项目。同时，北京清析技术研究院可对果蔬酶、粮食酶、畜肉酶、禽肉酶、水产酶、鲜肉酶、干肉酶、速冻食品酶、调味品酶、饮料酶、奶制品酶、酒类酶、食用油脂酶、罐头食品酶、保健食品酶、药品酶、绿色食品酶、食品添加剂酶、环境污染物降解酶、生产工艺酶等进行植物酶活的检测。

检测方法

常用的植物酶活检测方法有过氧化物酶法、过氧化氢酶法、过氧化物酶法、超氧化物歧化酶法等。下面将具体介绍过氧化物酶法：

1、化学滴定方法是一种经典的定量测定方法。过氧化氢酶的化学滴定方法,主要分为高锰酸钾滴定法和碘量滴定法。

①高锰酸钾滴定法：酶的存在, 会促使过氧化氢分解,用已知浓度的高锰酸钾溶液来定量测定体系中的过氧化氢, 通过对照试验可以知道酶消耗过氧化氢量, 从而确定酶的量。

②碘量法的原理是利用h2o2能将ki中的i-氧化生成i2,以淀粉作为滴定终点指示剂,用硫代硫酸钠滴定,计算出生成i2的量,再换算成所消耗h2o2的量。

2、紫外分光光度法

在紫外波长范围内,随着波长的缩短,h2o2对光的吸收逐渐增加。h2o2在240nm处有一个吸收高峰, 其吸光度与h2o2的含量成正比,过氧化氢酶能分解过氧化氢,使反应溶液吸光度(a240)随反应时间而降低。单位时间内吸收的差值就是过氧化氢酶的活性。紫外分光光度法也可采用294nm处波长测定cat的活性。

3、电化学法

①极谱氧电极法

利用过氧化氢酶可专一分解过氧化氢为氧与水,氧电极对溶解氧具有高度选择性的原理, 用溶氧仪定量检测由过氧化氢酶分解h产生的溶解氧。

②电泳- 染色法

根据样品中粒子带电荷的不同, 通过聚丙烯酰胺凝胶电泳后,再采用染色的方法进行检测。过氧化氢酶在聚丙烯酰胺凝胶电泳板上能分解过氧化氢, 生成水和氧气, 而没有被酶分解的过氧化氢,仍可以使高价铁(iii)还原为带普鲁氏兰的亚铁化合物, 凝胶背景显示出淡亮黄色区带, 可作为鉴定过氧化氢酶活性的特征。

检测步骤

1、取样

在不同生长期和不同部位的植物中各取样若干份，混合后制备成均匀的植物样品。

2、样品处理

将植物样品研磨成细末，加入适量的缓冲液，振荡摇晃一段时间，使酶能够从植物中完全溶解出来。

3、酶活检测

根据所选的检测方法，向提取液中加入一定量的试剂，观察化学反应的进行情况，计算出植物中酶的活性。

检测标准

1、t/cccmhpie 1.18-2016 植物提取物 木瓜蛋白酶

2、gb/t 5009.183-2003植物蛋白饮料中脲酶的定性测定

3、gb/t 40368-2021 植物代谢产物胰蛋白酶抑制因子测定酶联免疫吸附法

4、gb/t 40223-2021 植物代谢产物游离棉酚测定酶联免疫吸附法

5、gb/t 40220-2021 植物代谢产物大豆凝集素测定酶联免疫吸附法