病毒灭活原理 细胞感染技术 病毒灭活检测 飞凡检测 第三方检测机构

1、破坏包膜:包膜含有脂类物质，因之有包膜的病毒可*被脂溶剂破坏，如、氢仿或去氧胆酸钠可使病毒灭活。实际上可利用病毒对脂溶剂的敏感性来检查病毒是否有包膜。物理因子，如渗透压改变、冻融、热和干燥等都可引起包膜破坏。一般认为，呼吸道感染的病毒对于燥抵抗力弱，传播主要是人间直接感染，这是因为有包膜的原故。

2、病毒蛋白质变性:能使蛋白质变性的化学制剂郜能使病毒灭活，如酚、、次氩化物、酸和碱等。加热引起变性也是有效灭话的方法。一般说病毒对热抵抗力弱，60℃几分钟就使之感染性明显降低，因此在分离病毒时，从患者取来的标本需低温保存，*送往实验室，长期保存置于-8oc以下的低温条件。

3、病毒核酸的损害:、y线等电离辐射可切断核酸，紫外线可使核苷酸链上相邻的崆啶减基形成二聚物，而破坏病毒基因的功能。另外叶啶橙或中性红等染料可与病毒核酸结合，暴露于光线之下，可使核酸分解，而使病莓灭活。

病毒灭活滴度计算方法∶终点稀释法病毒感染滴度的计算以半数细胞感染剂量(tcid5o)表示。tcid5o的对数值计算公式如下。

tcd5o对y数值=病变率*50%组稀释度的对数值+距离比例(“病变率*50%组”是指病变率*过50%的组,下简称“*50%组”;“病变率**50%组”是指病变率**50%的组，下简称“**50%组”)。

病毒灭活试验器材:

1、试验用病毒株:脊髓灰质炎病毒1型(poliovirus-l，pv-l);株;艾滋病病毒1型(hiv-1)美国株。

2、宿主细胞可采用vero细胞系、bgm细胞、hela细胞系或fll、细胞系，作为pv-1的测试细胞。用含有人t淋巴细胞白血病房毒1型(humantcell leukemiavirus 1, htlv-1)基因的人淋巴细胞(株)作为hiv-1的测试细胞。

3、细胞培养瓶与96孔培养板。

4、恒温水浴箱。

5、二氧化碳培养箱。

6、层流*净工作台。

7、低温冰箱(-20°℃,-80°c).8、液氮罐。

9、倒置显微镜。

10、离心机。

11、可调移液器及配套一次性塑料吸头。12、细胞维持培养基。

13、细胞培养基。

14、去离子水。

病毒灭活试验适用范围:主要适用于消毒产品或日常监测。用具有一定代表性的、活的病毒及其细胞感染技术，评价各种用途的消毒因子对测试病毒的杀灭效果。按此方法进行的试验，只是对消毒因子的灭活病毒能力的重要方面进行验证。