酶底物法检测机构

酶底物法是一种用于检测水中细菌的方法，具体原理如下：

   利用大肠菌群细菌产生的β-半乳糖苷酶分解onpg（o-硝基苯基-β-d-半乳糖吡喃糖苷）产生黄色物质，从而检测水样中大肠菌群的存在。

   利用大肠埃希菌产生的β-葡萄糖醛酸酶分解mug（4-甲基伞形酮-β-d-葡萄糖苷）产生蓝色荧光，进而检测水样中大肠埃希菌的存在。

酶底物法的特点包括：

   检测周期短，通常18至24小时即可出结果。

    实验操作简便，无需确认试验。

   可以同时检测水样中的大肠菌群和大肠埃希菌，甚至可以通过改变培养温度来检测耐热大肠菌群。

此外，酶底物法也应用于检测不同类型的水样，如饮用水、水源水、废水等。

检测步骤

1.准备样品：收集需要检测的水样。可以是自然环境中的水体，也可以是有可能受到污染的水源，如自来水、游泳池水或工业废水等。确保样品的质量和卫生。

2.制备培养基：使用假单胞菌属菌株生长所需的培养基。通常使用含蛋白胨、琼脂和盐等成分的培养基。

3.培养假单胞菌属菌株：取一定量的样品，将其接种到含有培养基的琼脂培养皿（petridish）中。将接种皿孵育在适宜的温度下，例如在37摄氏度下孵育24小时。

4.准备试剂：按照试剂盒说明书中的指导，准备好乙酰谷氨酰对氨基苄标准底物的浓度。

5.进行分析：取一定量的培养皿上的培养物，转移至小容器中。加入适量的试剂，混匀后立即加载到荧光测定仪中。

6.测量结果：将样品放置在荧光测定仪中，根据仪器的操作说明进行测量。测量时需要规定适当的激发波长和发射波长。

7.结果解释：通过测量结果得到含有假单胞菌属菌株的样品中产生的荧光强度。根据事先设定的阈值，判断样品中是否存在假单胞菌属菌株。荧光强度高于阈值可以确定样品中存在假单胞菌属。

8.分析数据：根据测量结果，可以进行统计学分析，计算出水样中假单胞菌属的数目。可以利用相关软件进行数据处理和绘图，得到详尽的结果。

检测标准

1、db37/t 4153-2020 水质 肠球菌的测定 酶底物法

2、db21/t 3111-2019水质肠球菌的测定固定底物技术酶底物法

3、db61/t 1138-2018 水质 粪大肠菌群的测定酶底物法

4、t/wsjd 26-2022 水中嗜肺军团菌检验方法——酶底物法

5、t/hbfia 0034-2022 水中肠球菌测定 荧光酶底物法

6、t/gxas 523-2023 污泥 粪大肠菌群的测定 酶底物法

7、sn/t 5523-2023 水中铜绿假单胞菌的测定 酶底物法

8、t/hbfia 0037-2023 生活饮用水中嗜肺军团菌的测定酶底物法

9、t/hbfia 0026-2021 包装饮用水中铜绿假单胞菌的测定酶底物法

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