噬斑形成试验 病毒感染性检测实验 飞凡检测 第三方检测机构 细胞培养
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- 更新时间
- 2024-05-27 18:00
噬斑形成试验(plaque formingassay,pfa)是一种用于检测病毒感染性的实验方法,它通过观察病毒在宿主细胞上形成的噬斑(clearings)来定量分析病毒的数量和感染能力。噬斑是病毒复制并在宿主细胞上引起细胞病变的结果,从而在细胞培养板上形成可见的透明区域。
噬斑形成试验的基本步骤包括:
细胞培养:首先需要培养好宿主细胞,这些细胞可以是被测试病毒的敏感细胞。
病毒接种:将不同稀释度的病毒悬液接种到细胞培养板中,通常在细胞培养板的每个孔中加入一定量的病毒悬液。
培养:将接种了病毒的细胞培养板放回培养箱中,让病毒在宿主细胞中复制。
固定和染色:病毒复制后,需要将细胞固定并染色,以便于观察噬斑。常用的固定剂有甲醛或丙酮,染色剂则有结晶紫、甲苯胺蓝等。
观察和计数:在染色后的细胞培养板下观察,可见的噬斑会被计数。每个噬斑代表一个感染性病毒颗粒感染并杀死了一个宿主细胞。
数据分析:通过噬斑的数量来计算病毒的滴度,即每个病毒颗粒的感染能力。
噬斑形成试验是一种传统的、可靠的病毒滴度测定方法,但它的缺点是操作繁琐、费时,且对病毒滴度的测定有一定的主观性。尽管如此,由于其可以直接反映病毒的感染性,因此在某些情况下仍然是shouxuan的方法。
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