检测技术服务:百泰派克生物科技BTP客户案例：利用Edman降解法对重组Der f 3的蛋白条带进行N端测序

检测技术服务:百泰派克生物科技btp客户案例：利用edman降解法对重组der f3的蛋白条带进行n端测序--检测技术服务详情

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期刊：molecular immunology；影响因子: 4.2397

原文链接：doi: 10.1016/j.molimm.2019.02.018

研究对象：气道上皮细胞

研究目的：der f 3对气道上皮屏障影响及诱导炎症的分子途径研究

研究手段：n端edman测序等

研究内容及结论：过敏原的蛋白酶活性被认为参与了过敏性疾病的发病机制。来自粉尘螨（dermatophagoidesfarinae）的主要过敏原der f 3具有丝氨酸蛋白酶活性，但其免疫发病机制尚不清楚。该研究旨在探讨der f3对气道上皮屏障的影响，以及其诱导炎症的分子途径。采用检测支气管气道上皮细胞（aec）中天然der f3和热灭活（h）der f3的差异表达基因，并结合实时荧光定量pcr（rt-pcr）和elisa进行验证。与其他蛋白酶过敏原（如在aecs中诱导th2促进警报素（il-25、il-33、tslp））不同，derf 3诱导促炎细胞因子和趋化因子包括il-6、il-8和gm-csf，它们已知促进th17反应。这些促炎介质是由der f3通过mapk和nf-κb通路以及存储操作的钙信号通路诱导的。a549和beas-2b细胞的小干扰rna沉默表明，der f3对aecs的激活主要依赖于蛋白酶激活受体2（par-2），而par-1也是aecs完全激活所必需的。par-1

和par-2的双敲除在很大程度上损害了der f3诱导的il-8的产生和随后的信号通路。该研究的数据表明，der f3通过pars-mapk-nf-κb轴诱导人上皮细胞系中的促炎介质。该研究结果提供了der f3可能触发倾斜于th17的对室内尘螨过敏反应的分子机制。

利用edman降解法对重组der f 3的蛋白条带进行n端测序，该服务由北京百泰派克生物科技提供。序列分析结果表明重组的der f3在渗析后达到成熟。

参考文献：li b, zou z, meng f, et al. dust mite-derived der f 3activates a pro-inflammatory program in airway epithelial cells viapar-1 and par-2[j]. molecular immunology, 2019, 109: 1-11.

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