一、原理
本试剂盒采用固相酶联免疫吸附elisa原理，通过黄曲霉毒素b1(afb1)抗原和曲霉毒素b1(afb1)抗体，待测抗原的竞争免疫反应，以及酶的催化显色反应来检测afb1，优点是灵敏度高，特异性好，操作简便，结果易判读，适用于食品、饲料及相关原料中afb1的定量检测。
二、试剂盒技术指标
试剂盒灵敏度：0.1 ppb
回收率： 谷物/饲料中afb1回收率 95%±15%
变异系数：批内变异系数<10%，批间变异系数<15%。
三、试 剂 盒 组 成
1．微量测试孔： 96t/8孔
2．标 准 液×6瓶：（1 ml/瓶） 0 ppb 0.05 ppb 0.15 ppb 0.45 ppb 1.35 ppb 4.05 ppb
3．抗体工作液 7 ml
3．酶标记物 12 ml
4．底物缓冲液 7 ml
5．底物液 7 ml
6．终止液 7 ml
7．20倍浓缩洗涤液 50 ml 加蒸馏水后稀释到1000ml。
四、样本前处理步骤
实验准备：配制60 %甲醇水溶液（v/v，60：40）和20 %甲醇水溶液（v/v，20：80）。
注意：请配制上述溶液，以免影响检测的准确性。
1 . 脂肪含量低的固体样品（如大米、玉米、小麦和饲料等）
1、称取5 g 粉碎样品于100 ml带塞三角瓶内，准确加入25 ml 60%甲醇水溶液。
2、将加入了甲醇水溶液的样品放入振荡器内（或用手强力振荡），充分振荡3 min后，用滤纸过滤，收集滤液。
3、取滤液2 ml，加入6 ml 20 %甲醇水溶液，混匀，用whatman 1号滤纸过滤，此为样品待检液。
2．酱油、醋
1、称取5 g样品于25 ml小烧杯中，用10 ml蒸馏水将试样转移到125 ml分液漏斗中，加入25ml三氯甲烷，加塞轻轻振摇3 min，静置分层。
2、放出下层三氯甲烷层，取5 ml于20 ml蒸发皿中，65 ℃水浴通风挥干。挥干冷却后，准确加入5 ml60%甲醇水溶液，将蒸发皿中的凝结物充分溶解。
3、取溶解液2 ml，加入6 ml 20%甲醇水溶液，混匀，此为样品待检液。
3．食用油（如菜油、麻油、色拉油、花生油等）
1、称5 g油样于25 ml小烧杯中，用20 ml石油醚或正乙烷分次将试样转移至125 ml分液漏斗中，准确加入25 ml60%甲醇水溶液溶液，加塞轻轻振摇5 min，静置分层，放出下层60%甲醇水提取液。
2、取提取液2 ml，再加入6 ml 20%甲醇水溶液，混匀，此为样品待检液。
4．酒类
1、称取5 g样品于125 ml分液漏斗中，加入25 ml三氯甲烷，加塞轻轻振摇3 min，静置分层。
2、放出下层三氯甲烷层，取5 ml于20 ml蒸发皿中，65 ℃水浴通风挥干。挥干冷却后，准确加入5 ml60%甲醇水溶液，将蒸发皿中的凝结物充分溶解。
3、取溶解液2 ml，再加入6 ml 20%甲醇水溶液，混匀，此为样品待检液。
5．花生
1、样品去壳粉碎，称取5 g于100 ml具塞三角瓶中。加入25 ml 60%甲醇水溶液和20ml正乙烷（或石油醚），振摇10 min，用whatman 1号滤纸过滤。
2、收集滤液于125 ml分液漏斗中，静置分层后放出下层60%甲醇水提取液。
3、取提取液2 ml，再加入6 ml 20%甲醇水溶液，混匀，再用whatman 1号滤纸过滤，此为样品待检液。
6．月饼、桃酥、花生酱等
1、称取5 g粉碎样品于125 ml具塞三角瓶中，准确加入25 ml 60%甲醇水溶液和20ml正乙烷（或石油醚）加塞震荡10 min，过滤，收集滤液于分液漏斗中，静置分层。
2、待下层甲醇水溶液澄清后，放出甲醇水溶液于另一三角瓶中。吸取10 ml甲醇水提取液于125 ml分液漏斗中，加入20ml三氯甲烷，加塞轻轻振摇3 min，静置分层。放出下层三氯甲烷层，取10 ml于20 ml蒸发皿中，65℃水浴通风挥干。挥干冷却后，准确加入5 ml 60%甲醇水溶液，将蒸发皿中的凝结物充分溶解。
3、取溶解液2 ml，再加入6 ml 20%甲醇水溶液，混匀，此为样品待检液。
7．面粉、饲料浓缩料
1、称取5 g样品于125 ml具塞三角瓶中，准确加入25 ml 60%甲醇水溶液加塞震荡10min，过滤，收集滤液。
2、吸取10 ml滤液于125 ml分液漏斗中，加入20 ml三氯甲烷，加塞振摇3min，静置分层。放出下层三氯甲烷层，取10 ml于20 ml蒸发皿中，65 ℃水浴通风挥干。挥干冷却后，准确加入5 ml60%甲醇水溶液，将蒸发皿中的凝结物充分溶解。
3、取溶解液2 ml，再加入6 ml 20%甲醇水溶液，混匀，此为样品待检液。
注意：
1、某些样品待检液(如花生等)久置会影响检测结果的准确性，为保证检测的准确性，样品提取后请即时检测。
2、 若样品待检液不立即检测，请将其存储于棕色玻璃瓶内，2-8 ℃避光保存。
3、 试剂盒在使用前，请将试剂盒内所有试剂放到室内温度（20-25 ℃）进行温度平衡；试剂用完后立即将其放置回2-8℃冰箱内保存。
4、在每个步骤操作时，速度要快，不要将板孔暴露在空气中时间过久，避免酶标板变干。未用完的酶标板需密闭于自封带内，防止受潮且避光保存于2-8℃冰箱内。
5、 温育时，需避光，建议将酶标板置于湿盒内(在有盖容器内放置一块平整湿纱布)进行温育。