斑马鱼鱼卵毒性试验 HJ 1069-2019 水质 急性毒性的测定 斑马鱼卵法

斑马鱼卵毒性试验是一种常用的水质急性毒性测定方法，可用于评估水质中化学物质的毒性，包括农药、重金属、污染物等。下面飞凡检测小编张同学将详细介绍hj1069-2019标准中所规定的斑马鱼卵法的试验步骤及操作流程。

一、实验材料及仪器

斑马鱼（danio rerio）：选取健康、生长正常的成年鱼，并在恒温恒湿环境下进行饲养。

鱼卵孵化液：以***（nano3）、氯化钙（cacl2）、氯化钾（kcl）、硫酸镁（mgso4）和海盐（instantocean®）为原料，按照标准配方制备。

试剂：乙醇、甲醛、琼脂、双氧水、培养基等。

仪器：显微镜、平板振荡器、恒温恒湿箱等。

二、实验步骤

进行鱼卵采集：将成年斑马鱼放入产卵网中，待其自然产卵，再用滤网将鱼卵分离出来。

准备毒性梯度：将预处理好的试验物质（农药、污染物等）按要求配制成不同浓度的溶液。

开展实验操作： （1）将斑马鱼鱼卵均匀分布于孵化板上； （2）按照每个孔位所需的孵化液体积，加入相应的毒性梯度试验物质；（3）在平板振荡器中以恒定频率和幅度振荡，保持水流通畅，促进孵化；（4）观察并记录孵化情况，包括卵壳透明度、胚胎发育状态、死亡数量等； （5）根据实验结果，计算出半数致死浓度（lc50）值。

三、数据处理及结果分析

数据处理：根据实验结果，分别计算出每个试验组的死亡率，并绘制出剂量-响应曲线。

结果分析：根据剂量-响应曲线，确定半数致死浓度（lc50）值。若试验物质毒性较强，可通过逐步稀释法进行多次实验，确定lc50值的**性。同时，对于无法通过斑马鱼卵法进行毒性测定的物质，可采用其他适宜的方法进行评价。

四、注意事项

实验前应进行充分的准备工作，包括试剂备好和仪器设备检查等。

实验过程中应保持恒温恒湿，并严格控制试验条件，以保证实验结果的准确性。

操作时需注意安全，如避免化学品接触皮肤和吸入有害气体等。

实验结束后，应对实验区域及相关设备进行清洁和消毒处理。