Makler 精子计数板

makler精子计数板是一种易于使用的设备，用于未稀释样品的快速**的精子计数、精子活动性和形态学评估。
此计数板由两部分组成
1，下面的主要部分有一个金属基底(a)和两个把手(h)。在基底的中心有一个光学水平玻璃的平盘(d)，样品(s)放置其上，平盘上有四个柱(p)。柱有10 微升高。
2.上面部分是盖玻片(c)，由一个金属环环绕盖玻片下表面中心有一个lmm的格子，被分为100个方格，每个是0.1mmx0.1mm。将盖玻片置于四个柱上，在一行上的10个方格包围的空间就是一毫升的百万分之一。因此，在10个方格里的精子数量代表着它们以百万/ml 为单位的浓度。

附件:
1、清洁剧
2、无绒镜头擦拭纸
3、板夹头--在精子分析期间，此设备应放置于显微镜平台上。它紧紧夹住计数板使之可以在平台上平滑移位。当精子分析结束，握住板夹头并使得计数板滑出。要进行新的精子分析时，再次把计数板滑进夹头。


计数板的准备:
在把样品放冒在平盘上之前，确保相对表面彻底清洁且无尘，因为大多数颗粒的尺寸大于玻璃间的狭小空间。因此，用镜头擦拭纸擦平盘和盖玻片的两个表面。如果要检查清洁程度，可通过把盖玻片放置到四个柱上，观察到四个接触点彩色边纹(newion现象)。对着荧光灯可以看到效果。
精液分析的方法
充分混合样品，注意避免产生气泡。通过木棒或者移液管的辅助，将样品滴一小滴至平盘中心。用手指拿起盖玻片黑色点的反面，并立即放置到四根柱子上。轻轻按压，再次观察彩色边纹。液滴会在平盘的整个区域扩散成厚度10微米的薄层。
只要四柱未被淹没，添加一些样本不会影响正常的分析。一旦盖玻片就位，避免触摸、拍起以及再次盖下去。因为这些会改变计数板内精子的平均分布。捏着把手把计数板提起，并将计数板放置于显微镜平台上。此过程可能需要用板夹头来固定。
特别注意事项
**不要对此计数板使用40x物镜。因为这样做会佳盖玻片在聚住中被破坏。即使使用合适的20x物镜，也要小心的避免压到盖玻片上。一般当物镜末端距离表面 1mm的时候，图像是清晰的。如果因为不正确的使用显微镜导致盖玻片损害，我方将不予以负责。
推荐使用20x倍物镜和 10x倍目镜。不推荐使用 10x物镜，因为10x物镜下的精子看起来太小了，除非用 20x目镜。40x物镜不能用，是因为盖玻片厚度问题，
精子计数:
若精子密度太大并且精子过于活跃，需要先对它们进行固定。做法很简单，将一部分样本转移到另外一个试管，然后将试管插入50-60°℃的热水中大约5分钟、移取一滴充分混合的、预热过的样本置于计数板平盘上，盖上盖玻片。计数网格的方格里的精子头部，与血液学中计数血细胞的方法一样
如果精子数足够，在连续一列 10个方格里对其计数。该数量代表了以百万每毫升为单位的浓度。在其它一列或者两列里重复此操作，以测定平均值。可以选择用其它2滴或3滴样品进行计数，以提高计数的可靠性。在精子缺乏症的样品中，推荐对整个格子区域计数。
在精子聚焦之后，移动星微镜平台将网格定位在视野中心。然后，调节计数板，以使格子线出现在水平和垂直位置。
在搜索期间你可能观察到:
有限
a)精子是否分布均匀?如果不，说明样品没有混合均匀;
b)是否所有精子都处于一个聚焦平面而没有模糊?如果不是，可能是表面没有清洁或两个表面间有大的颗粒。
出现以上任一种情况，都要再次从头开始。
活动性评价:
推荐在样品准备好3-5分钟之内进行活动性评价，以避免从周边移动过来的精子的干扰。计数9或16格内所有不能动的精子。然后计数相同区域内能动的精子，按活力级别+1到+4 评估其活动性。在格子的另一个区域重复此过程，以及另测3至4滴样品活力，计算平均值。
这样的评估比原始载玻片上的要**很多，因为那里精子可能被盖玻片压缩，活动性被损害。makler精子计数板提供了标准条件，所有分析样品精子都可以在一个无摩擦的水平面自由移动。
形态学:
快速精子形态学评价可以从一个湿的未染色的样品进行，其包含固定的精子。推荐使用一个相差显微镜。在格子一个特定区域计数所有正常和不正常精子，且从其它样品重复此过程以达到总计数200。显然，精子缺乏症样品能观察到的精子数会更低。
该精子计数板不适合染色干片的样品的形态分析。
特殊情况:
气泡:如果格子区域出现气泡，建议换另外一滴样品，除非气泡非常小，不影响分析。大的灰尘颗粒，纤维等，也会通过改变空间大小来影响计数，也应该更换一滴样品。如果样品没有混匀，高度粘稠，或计数板表面有颗粒或灰尘:在同一样品不同滴之间计数会出现较大差别。
凝聚:如果测之前放置时间过长，预热过的精子有时会凝聚在计数板内。这种情况下，选用另外一滴适当混合的样品替换。在个别情况下，在格子区域内会出现胶状聚集，此时应更换另外一滴样品。
结晶:样品时间过长可能包含晶体，虽然可能不会影响计数，但使计数更困难。有时候，这些晶体太大，可能会损坏表面区域。因此，分析包含品体的样品时需要特别注意。
清洗以及下次使用准备:
不要用自来水淋洗或浸泡计数板。把刷子蘸水或非腐蚀性杀菌溶液，擦拭玻璃的两面。然后挤压刷子将残留的水弄掉，*后用无绒镜头擦拭纸擦干表面。尽量避免接触柱的顶端。这样，该计数板就可以再次使用了。
一般来说，一旦观察的位置固定，不需改变聚焦。无需抬高物镜，简单的把社数板滑进滑出即可。