鱼粉DHA与EPA占鱼粉总脂肪酸比例之和检测

附录b(规范性)

鱼粉中 dha 与epa占鱼粉总脂肪酸比例之和的测定

b.1原理

用石油醚提取试样中的粗脂肪﹐在碱性条件下脂肪经皂化、甲酯化生成脂肪酸甲酯,经气相色谱仪分析,峰面积归一化法测定dha 与epa占鱼粉总脂肪酸比例之和。

b.2试剂或材料

除非另有规定,仅使用分析纯试剂。

b.2.1 水:gb/t 6682,三级。

b.2.2正庚烷:优级纯。

b.2.3甲醇:色谱纯。

b.2.4 石油醚;沸程30 ℃~60 ℃。

b.2.5无水硫酸钠:150℃烘干1 h,密封保存,备用。b.2.6****甲醇溶液:15%(市售)。

b.2.7︰2%氢氧化钠甲醇溶液;称取2g 氢氧化钠,溶解于100 ml.甲醇中,混匀,备用。b.2.8饱和氯化钠溶液;称取360 g 氯化钠,加入1 000 ml.水,搅拌溶解,澄清后备用。

b.2.9 dha和epa甲酯混合标准溶液(2.0 mg/ml.):称取20 mgdha甲酯标准品(cas号;2566-90-7,含量≥98%)、20 mgepa甲酯标准品(cas号;2734-47-6,含量≥98%)(**至0.000 0l g)于10ml.容量瓶中,用正庚烷溶解、定容,混匀。—18℃以下保存,有效期3个月。

b.2.10快速滤纸;定量。

b.3―仪器设备

b.3.1电子天平:感量1 g.0.000 1 g,0.000 01 g。

b.3.2气相色谱仪:配有氢火焰离子检测器(fid检测器)。

b.3.3恒温水浴锅;温度可达80 ℃﹐控温精度士1 ℃。

b.3.4干燥箱:温度可达150 ℃,控温精度士1 ℃。

b.3.5 往复式振荡器:不低于180 次 / min,温度能保持在25℃士1 “℃。b.3.6旋转蒸发仪。

b.3.7涡旋混合仪。

b.4样品

按gb/t 20195制备样品至少200 g,粉碎使其全部通过1 mm孔径的分析筛﹐充分混匀,装入磨口瓶中,立即检测。

b.5试验步骤

b.5.1粗脂肪提取

平行做两份试验。称取100 g 试样,分别包在10个滤纸包中(勿用脱脂棉线捆扎),置于500 ml具塞三角瓶中,加入 300ml.石油醚浸泡滤纸包﹐加入无水硫酸钠10 g,通氮气30 s,立即加塞。于25 c