多抗制备佐剂怎么选择 博特龙技术有限公司

【摘要】 目的建立一种快速制备甲胎蛋白单克0隆抗0体(afp—mcab)杂交瘤细胞系的方法。 方法 以常规和改良两

种方式同时免0疫8～12周balb／c小鼠，取小鼠脾细胞与骨0髓瘤细胞sp2／0融合并行次黄piao呤、氨基蝶呤与胸苷选择性培养。

用间接酶链免0疫吸附试验法(ei。isa)筛选阳性克0隆株，并建立细胞系。 结果在较短时间内，改良法能获得高0效价的免0疫

抗0体，与常规免0疫法相比有极显著差异(p<0．001)，同时改良法的细胞融合率和抗0体阳性率也显著高于常规免0疫法

(p<o．001)。筛选获得的高0效分泌抗人afp—mcab的阳性杂交瘤细胞珠进行了初步鉴定。 结论新的改良方法优化了

常规的mcab制备中动物免0疫程序，并能成功筛选出afp—mcab杂交瘤细胞系。

综上所述，新的改良的小鼠免0疫方法具有很好实验效果。孕妇血0清afp水平的变化与唐氏综合征有密切关系。目前孕中期人绒毛膜促性腺激0素(hcg)联合afp筛查唐氏综合征胎儿已成为欧美亚许多国家常规服务项目之一，在假阳性率为5％左右情况下，这种筛查方案对唐氏综合征的检出率可以达65％～75％[9-11|。因而免0疫方法测定血0清中afp浓度已在临床得到广泛应用。羊水和母体血0清中afp浓度的升高，对胎儿神经管缺陷和其他遗传缺陷的产前诊断，也具有应用价值。在大多数原发性肝细胞癌和内胚窦癌患者血0清中afp浓度升高，检测afp有助于肿0瘤的早期诊断，也是在治0疗过程中观察疗0效的一项指标。采用本实验新改进的方法制备afp—mcab，多抗制备佐剂怎么选择，对胚胎发育、癌变过程中基因表达、afp的纯化、肝0癌的导向治0疗以及提供诊断0试剂等都有重要的实际应用意义。

杂交瘤细胞的筛选与克0隆

细胞融合后，培养于添加了 hat 的选择培养基的 96 孔板中，培养一天后半定量换液，培养基更换时应注意轻缓，第 5天能在显微镜下看到明显的杂交瘤细胞克0隆，第 7 天左右，杂交瘤细胞能长至铺满孔底约 1 /10。此时进行 elisa检测养心细胞孔。取细胞培养上清对 mrj 融合蛋白进行间接elisa检测，筛选出能分泌抗0体的杂交瘤细胞孔，有限稀释法对阳性孔进行亚克0隆，经过 3 次亚克0隆后，获得了能够稳定 分 泌 抗mrj 融合蛋白单克0隆抗0体的细胞株。对杂交瘤细胞株按从 96 孔板-24 孔板-10 cm培养皿的顺序扩大培养，部分细胞用于腹0水制备单抗，部分细胞冻存备用。

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