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虽然包含在组合物中的甲醛的量通常关于组合物的百分数 (重量/体积（〃w/v

〃)）提及，但基于某些因素（例如蛋白质浓度）来调节化学计量学可能 是重要的。例如，

本文预期的甲醛的合适的浓度为在各个毒素 a和/或毒素 b多肽内提供 分子间交联，并且还

未实质彼此交联多肽（例如，未产生分子间交联）的浓度。如在实施例 中显示的，包含0.5 

mg/ml毒素 a的组合物可仅需要0.21% (w/v)甲醛。然而，包含较高浓 度的毒素 a的组合物

可需要较高或较低浓度的甲醛以产生所需的分子内交联（例如，类毒 素化），并且还未产

生实质量的分子间交联。相同的原则可适用于毒素 b的类毒素化。具体 组合物的合适的条

件可通过本领域普通技术人员使用本文描述的或本领域可得到的技术 来确定。例如，具体

量的甲醛对于组合物中的具体毒素的类毒素化是否有效可使用在实施 例部分中描述的细胞

毒性测定、阴离子交换色谱法、尺寸排阻色谱法、胺含量分析、抗原性 和免疫原性测定中

的任一种或多种来确定。还应理解的是，虽然本文使用甲醛，但其它类似 的作用剂可因此

替代，如本领域普通技术人员可确定的。例如，在一些实施方案中，甲醛可 被戊二醛替代

。此外，还应理解的是，虽然本文使用在磷酸盐缓冲液中类毒素化，但其它类 似的作用剂

可因此替代，如本领域普通技术人员可确定的。例如，在一些实施方案中，使用 含有甘氨

酸和/或赖氨酸的缓冲液。虽然可需要不同的浓度来进行这样的替代，但用于这 样的替代的

合适的条件可使用本文描述的技术（例如，在实施例部分中描述的细胞毒性测 定、阴离子

交换色谱法、尺寸排阻色谱法、胺含量分析、抗原性和免疫原性测定中的任一种 或多种）

来确定。