南通市蜂蜜土霉素、四环素、金霉素检测

1.范围

gb/t 18932的本部分规定了蜂蜜中土霉素、四环素、金霉素、强力霉素残留量液相色谱测定方法。

本部分适用于蜂蜜中土霉素、四环素、金霉素、强力霉素残留量的测定。

本部分的方法检出限:土霉素、四环素、金霉素、强力霉素均为0.010mg/kg。

2.规范性引用文件

下列文件中的条款通过gb/t18932的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分,然而,鼓励根据本部分达成协议的各方研究是否可使用这些文件的新版本。凡是不注日期的引用文件,其新版本适用于本部分。

gb/t 6379-1986 测试方法的精密度 通过实验室间试验确定标准测试方法的重复性和再现性(ne:1981)

gb/t 6682-1992 分析实验室用水规格和试验方法(neq iso 3696:1987)

3.原理

试样中四环素族抗生素残留用0.1mol/lna2edta-mcllvaine(ph=4.0±0.05)缓冲溶液提取,经离心后,上清液用 oasishlb或相当的固相萃取柱和阴离子交换柱净化,紫外检测器高效液相色谱仪测定,外标法定量。

4.试剂和材料

除另有说明外,所用试剂均为分析纯,水为gb/t 6682-1992规定的一级水。

4.1 甲醇:一级色谱纯。

4.2 乙腈:一级色谱纯。

4.3 乙酸乙酯:重蒸馏。

4.4 磷酸氢二钠(na2hpo·2h2o):优级纯。

4.5 柠檬酸(c6h8o7·h2o)。

4.6 乙二胺四乙酸二钠(na2edta·2h2o)。

4.7 草酸

4.8 磷酸氢二钠溶液:0.2mol/l。称取28.41g磷酸氢二钠(4,4),用水溶解,定容至1000ml。

4.9 柠檬酸溶液:0.1mo/l。称取21.01g柠檬酸(4.5),用水溶解,定容至1000ml。

4.10mcllvaine缓冲溶液:将1000ml0.lmol/l柠檬酸溶液(4.9)与625ml0.1mol/l磷酸氢二钠溶液(4.8)混合,必要时用氢氧化钠或盐酸溶液调节ph=4.0±0.05。

4.11 na2edta- mcllvaine缓冲溶液:0.1mol/l。称取60.5g乙二胺四乙酸二钠(4.6)放入1625ml mcllvaine缓冲溶液(4.10)中,使其溶解,摇匀。

4.12 甲醇十水(1+19):量取5ml甲醇(4.1)与95ml水混合。

4.13 oasishlb固相萃取柱或相当者:500mg,6ml。使用前分别用5m甲醇和10ml水预处理,保持柱体湿润。

4.14 阴离子交换柱:羧酸型,500mg,3ml。使用前用5ml乙酸乙酯预处理,保持柱体湿润。

4.15 土霉素、四环素、金霉素、强力霉素标准物质:纯度≥95%。

4.16土霉素、四环素、金霉素、强力霉素标准溶液:0.1mg/ml。准确称取适量的土霉素、四环素、金霉素、强力霉素标准物质(4.15),分别用甲醇配成0.1mg/ml的标准储备液。储备液贮存在-18℃。

根据需要用流动相逐级稀释成适当浓度的混合标准工作溶液,混合标准工作溶液在4℃保存,可使用3天。

5.仪器

5.1 高效液相色谱仪:配有紫外检测器。

5.2 分析天平:感量0.1mg,0.01g。

5.3 液体混匀器。

5.4 固相萃取真空装置。

5.5 贮液器:50ml。

5.6 微量注射器:25μl,100μl。

5.7 刻度样品管:5ml,精度为0.1ml。

5.8 真空泵:真空度应达到80kpa。

5.9 离心管:50ml。

5.10 平底烧瓶:100ml。

5.11 ph计测量精度±0.02。

6.试样的制备与保存

6.1 试样的制备

对无结晶的实验室样品,将其搅拌均匀。对有结晶的样品,在密闭情况下,置于不超过60℃的水浴中温热,振荡,待样品全部融化后搅匀,迅速冷却至室温。分出0.5kg作为试样。制备好的试样置于样品瓶中,密封,并标明标记。

6.2 试样保存

将试样于常温下保存。