浙江枸杞粗多糖含量检测 重金属检测

枸杞多糖的检测方法

　　1、方法原理

　　粗多糖在硫酸的作用下，水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，与苯酚

　　缩合成有色化合物，用分光光度法测定样品在粗多糖含量。

　　2、主要设备和仪器

　　试剂

　　枸杞多糖标准液：称取105℃干燥恒重的标准枸杞多糖0.1000g，置100ml容量瓶中加热蒸馏水溶解稀释至刻度，其浓度为1.0mg/ml，用稀释成浓度为0.1mg/mld的标准工作液。

　　5%苯酚溶液：取苯酚100g，沙浴蒸馏，收集180℃-182℃溜分，称取此馏分5g，用水溶解后，定容至100ml棕色容量瓶中备用（现用现配）。

　　3、测定步骤

　　3.1、大吸收波长的选择

　　精密吸取0.04mg/ml无水枸杞多糖溶1.0

　　ml，置10ml具塞试管中，加入蒸馏水使体积为2.0ml，再加苯酚试液1.0ml，摇匀，迅速滴加浓硫酸5.0ml，摇匀后放置5min，置沸水浴中加热15min，取出后冷却至室温。以蒸馏水代替糖溶液如加上法配制空白。用721分光光度计在470-510nm测定吸光度，测定大吸收波长为490±nm。

　　3.2、标准曲线的绘制

　　精密吸收浓度为0.1mg/ml的枸杞多糖标准，标准工作液0、0.20、0.30、0.40、0.60、0.80ml，分别置于10ml具塞试管中，各加蒸馏水使体积为2.0ml，再加苯酚试液1.0ml，摇匀，迅速滴加浓硫酸5.0

　　ml，摇匀后放置5min，置沸水浴中加热15min，取出后冷却至室温。以蒸馏水代替糖溶液如上法配制空白。用721分光光度计，1cm比色皿，在490nm处测定吸光度，绘制葡萄糖浓度-吸光度工作曲线。结果浓度在0.010-0.04mg/ml范围内与吸光度呈现性关系。

　　回归方程y=7.52×10-3x+1.13×10-3,

　　y=0.9997(n=6)。

　　3.3、含量测定

　　3.31、多糖的提取与精制

　　取300ml，用氟仿多次萃取，以除去蛋白质，加活性炭1%脱色，抽滤，滤液加入95%乙醇，使含醇量达80%，静置过夜。过滤，残渣用无水乙醇、丙酮、乙多次洗涤，真空干燥，即得粗多糖。

　　3.32、供试液的配制

　　精密称取粗多糖粉末0.2000g，置于50ml容量瓶中，定容，摇匀，即得供试品溶液。

　　3.33、样品含量测定

　　精密度吸取供试品溶液2.0ml，按“标准曲线绘制”项下方法分别测定吸光度。

　　4.结果计算

　　多糖含量（%）=（c·d）/v×100

　　式中：

　　c－供试液葡萄糖浓度（mg/ml）；

　　d－代试液的稀释因素；