实验室应如何进行方法验证

前言

在化学分析中，准确度、精密度、线性、检测限和定量限、特异性、耐变性和不确定度是评估分析方法性能和质量的重要参数。下面我将针对这些概念在化学分析中的具体应用和重要性进行详细阐述。

一、准确度

  准确度是衡量分析结果与真实值接近程度的指标。通过使用标准参考物质进行测定，并比较测定值与保证值，可以评估方法的准确度。准确度反映了方法系统误差和随机误差的综合影响。

  （1）通常应完成1—2个浓度水平的有证标准物质的测定，每个浓度水平要求采用至少6份同样的标准物质进行测定，计算测定结果的平均值、标准偏差与相对标准偏差。准确度（％）=平均检测浓度／标示浓度×100。

  （2）在没有有证标准物质情况下，应在样品基质中添加分析物测定回收率。应至少选择3个添加浓度，并且包含一定的浓度范围，定量限或靠近定量限的浓度为必选浓度，如果样品具有容许限，该容许限也是必选浓度。每个浓度水平至少平行测定6次，计算测量结果的平均值、标准偏差与相对标准偏差。回收率（％）=（加标试样测定值一试样测定值）／添加浓度×100。对于有机待测物，回收率指标应满足表1的要求；对于元素分析，回收率指标应在90％～110％之间。

  （3）对同一样品用不同原理的分析方法测试比对。不同待测物浓度范围内回收率要求不同。

二、精密度

精密度是指在规定条件下，多次独立测试结果之间的一致程度。它分为重复性和重现性两个分指标：

重复性：在同一实验室，由同一操作者使用相同设备和方法，对同一被测对象在短时间内进行多次测定，考察结果的一致性。

重现性：在不同实验室，由不同操作者使用不同设备和方法，对同一被测对象进行测定，考察结果的一致性。

三、线性

  线性是表征待测物浓度或量与响应值之间关系的特性。良好的线性关系使得在给定浓度范围内，可以直接或通过数学公式得到准确的检测结果。线性相关系数是衡量线性好坏的重要指标。

四、检测限和定量限

  检测限和定量限是表征方法检测能力的两个重要指标。检测限的确定有以下几种方式：

（1）至少20次平行测定空白样品所得的平均响应信号值加上平行测定值的标准偏差的3倍，对应的样品分析物浓度或含量称为该方法的检测限。

（2）对于分光光度法，以扣除空白值后的与0.01吸光度相对应的浓度值为检测限。

（3）色谱分析的检测限系指检测器恰能产生与噪声相区别的响应信号时所需要进入色谱柱的物质的zui小量，一般将其定为3倍信噪比响应值对应的样品分析物浓度或含量。

至少20次平行测定空白样品所得的平均响应信号值加上平行测定值的标准偏差的10倍，对应的样品分析物浓度或含量称该方法的定量限。

五、特异性

  特异性是指方法区分待测分析物和其他干扰物质的能力。在复杂混合物中，特异性好的方法能够准确测定目标分析物，而不受其他成分的干扰。

六、耐变性

  耐变性是指分析方法对可变试验因素的抗干扰能力。当测定条件发生细小变动时，耐变性好的方法能够保持测定结果相对稳定，不受影响。

七、不确定度

  不确定度是指由于测量误差的存在而对被测量值不能肯定的程度，是表征被测量的真值所处的量值范围的评定。不确定度包含若干分量，是由随机因素引起的分量和由系统因素引起的分量的综合。

  化学测试过程是一个复杂的过程，不确定度来源包括方法、取样、存放条件、提取条件、环境条件、测量条件、仪器效应、样品效应、空白校正、试剂纯度、化学计算、操作者的影响和随机效应等。在实践中，应依据中华人民共和国国家计量技术规范，选取重要的不确定度来源进行评定。估计和控制化学测试过程的不确定度分量，保证溯源链的连续性，是保证检测结果质量的关键。