细胞周期检测样本送检注意事项

1、样本收集：

a. 对于贴壁细胞：收集培养上清液到离心管中，用胰酶消化细胞，至细胞可以被轻轻用移液管或枪头吹下来时，加入前面收集的细胞培养液，吹下所有的贴壁细胞，并轻轻吹散细胞。再次收集到离心管内。350g离心5分钟，弃上清，加入1 ml预冷的pbs，重悬细胞，350g离心5分钟,弃上清备用。

b. 对于悬浮细胞：350g离心5分钟，弃上清，加入1ml预冷的pbs，重悬细胞，350g离心5分钟,弃上清备用。

c．对于组织样本：利用合适的单细胞制备方法将组织制备成单细胞悬液，去除残留的组织块，用pbs洗涤后重悬备用；

2、细胞固定： 将细胞在15ml离心管离心后，根据细胞数量加入5-10ml 70%酒精（用无水乙醇和去离子水配制，放于四度预冷，当天配置），需及时混匀，加一个混匀一个，用移液器轻轻吹散混匀，或者低速涡旋混匀，样本此时可置于4度固定4小时后染色上机，或可以放置在-20度暂存，待样本收集齐后统一染色上机分析；

3、样本运输: 将15ml离心管插在装有碎冰的泡沫盒中，或者置于试管架上，置于泡沫盒中，放置冰袋，封口运输，需记录加入70%酒精的大致时间，以便我们评估样本是否固定透膜充分；